DNA提取常见问题(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上DNA提取过程中各种试剂的作用及原理1溶液I溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA:(1)螯合Mg2、Ca2等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2溶液IINaOHSDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH12或pH3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6, 因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。(2)解聚细胞中的核蛋白。(3)SDS能与蛋

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