DNA浓度的检测(共11页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上可以。DNA的碱基在260nm处有吸收。用紫外分光光度计测260nm处DNA分子的OD值,就能通过朗伯-比尔定律OD=lc换算出浓度。式子里l是吸收光路的长度;c是浓度,单位一般用g/ml;是吸光系数,双链DNA一般取0.02ml/(gcm),单链DNA因为增色效应,要大一些,取0.05ml/(gcm)。如果知道一个DNA片段的碱基数,还可以换算出DNA片段的物质的量浓度。取1DNA,用ddH2O水稀释到1ml,以1ml ddH2O为对照,紫外分光光度计测定OD260,OD280,OD260/OD280(都在 1.8左右之间,说明 DNA样品纯度较高),concentration。 另,基因组DNA1的琼脂糖凝胶电泳检测均呈现完整清晰条带没有拖尾,说明 DNA 样品的完整性好,也可通过DNA marker 推算出DNA浓度。目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法。原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为

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