1、桑国俊甘肃省畜牧兽医研究所 1v一 发展背景v二 试验内容v三 结果与分析v四 总结2一 发展背景3v 随着胚胎工程技术的深入研究和商业性胚胎移植技术的发展,胚胎需求量日益增加,单纯依靠超数排卵获得体内胚的方法成本高、采胚数量有限,不能满足科研和生产的需要。卵母细胞体外胚生产体系的建立将成为胚胎生产的主要突破点。深入研究卵母细胞体外胚及其冷冻保存的技术机理,建立一套完全在体外培养条件下快速生产和保存胚胎的技术体系,挖掘优良母畜的繁殖潜力,具有巨大的科研价值与现实意义4v 牛胚胎体外生产技术的累积效率低、技术复杂、实验条件高,受培养基、卵泡液、共培养细胞等因素影响大,还缺乏统一的理论依据和程序化
2、的标准方案,仍处于探索阶段。因此,还必须不断改进和完善胚胎体外培养和生产体系5二 试验内容6v 试验内容 技术路线种公牛鲜精 冻精洗涤、离心精子获能母牛超排 卵巢采卵IVMIVFIVC桑、囊胚COCs7v 试验内容 试验设计v 1 卵母细胞体外成熟培养v 1.1 COCs级别 对卵母细胞成熟的影响v 1.2 卵泡直径对卵母细胞成熟的影响v 2 卵母细胞体外受精v 2.1 不同离心方法对精子获能和卵母细胞受精的影响v 2.2 不同上浮方法对精子获能和卵母细胞受精的影响v 2.3 精子浓度对卵母细胞受精的影响8v 3 胚胎体外培养v 3.1 共培养体系对胚胎发育的影响v 3.2 培养液体积对胚胎发育的影响v 4 冷冻保存 COCs的培养v 4.1 GL和 EG一步法冷冻对 COCs的影响v 4.2 麦管和 OPS管玻璃化冷冻对 COCs的影响v SPSS统计分析9三 结果与分析10