精选优质文档-倾情为你奉上MTT实验标准操作流程1. 原理活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用在570nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(即OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。2. 试剂及耗材CO2细胞培养箱、生物安全柜、倒置显微镜 、低速离心机、酶标仪、8道排枪、培养基 胎牛血清 、MTT、 DMSO、96孔细胞培养板、胰酶、血细胞计数板3. 注意事项MTT溶液的配制,通常MTT 配成的终浓度为5mg/ml,须用PBS或生理盐水做溶剂。MTT一般最好现用现配,0.22m过滤后4避光保存两周内,或配制成5mg/ml保存在-20长期保存,避免反复冻融,小剂量分装,用避光袋或锡箔纸包住避光以免分解,当MTT变为灰绿色时不能再用。DMSO可以直接溶解,无需配制,使用方便,溶解速度快,但对人