1、病理切片技术目录一、取材二、固定三、脱水四、透明五、浸蜡六、包埋七、切片八、染色一、取材n 取材是制作切片程序中的首要步骤,取材不当,将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要,不能随意的切取组织来制作组织切片,否则病理检验的结果是不会令人满意的。n 取材工具:取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦,以免损害组织造成人为组织变化,给诊断带来困难或导致错诊,漏诊。n 标本的选取:应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常组织交界处。组织宜小不宜大,以不超过 24x24mm2为佳,厚度以 35mm为度,过大过厚会影响对标本的固定,另方面也影响切片的制作。特殊目的者应属例外
2、。二、固定n 在组织病理学中,不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的保存,都必须进行及时的适当的和有效的固定。组织只有经过固定,才能完成随后的一系列的制作,直至切片的最后完成。1.固定的作用n 固定的作用,从组织学的角度其简单的定义是:保持细胞、组织的固有形态和结构,使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构。n 从免疫组化技术的角度,使细胞内蛋白质凝固,尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应;防止细胞的自溶,以免使抗原扩散至组织间质;保持组织的固有形态和结构;保持组织或细胞的抗原性。 2.固定的目的 n 能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。 n 保存细胞固有的物质,能凝固或沉淀细胞内或组织液,糖原等,使
3、细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样。 n 使组织硬化,便于切块。 n 对某些具有传染性的标本,能防止疾病的扩散。n 保存好大体标本。n 可增强染色的作用。3.固定的注意事项 n 组织固定越新鲜越好 n 组织固定,组织块不宜过大 n 对不同类型的组织应适当合理地选择固定液 n 组织固定,时间不宜太短,也不宜太长 n 固定液的量要充分 n 特殊病例或特殊物质应选择特殊的固定液 n 组织的第二次固定或后固定 4.固定液的使用 n 根据 Bencroft的分类法,可分为四种类型:n 醛类:甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。n 氧化剂类:四氧化锇,高锰酸钾,重铬酸钾等。n 蛋白变性类:甲醇,乙醇,醋酸等。n 其他:氯化汞,苦味酸等。上述四种类型的固定剂,最常使用的是甲醛,其余的也在其它病理技术方面中用到。