糖酵解中间产物的鉴定糖酵解中间产物的鉴定主讲教师： 张世忠专业技术职务： 讲 师山东农业大学 生命科学学院实验目的熟悉酶的专一性抑制剂研究代谢中间步骤的原理和方法 。增加对糖酵解过程的感性认识。实验原理糖酵解 (Glycolysis):葡萄糖降解为丙酮酸并伴随 ATP生成的过程。反应历程：第一阶段：己糖的磷酸化第二阶段：磷酸己糖的裂解 第三阶段：丙酮酸的生成代谢是由一系列酶催化的多步骤反应。代谢正常进行，中间产物的浓度低不易分析鉴定。若加入某种酶的专一性抑制剂，则可使其中间产物积累，便于分析鉴定。几种主要试剂的作用：硫酸肼：稳定剂，防止 3-磷酸甘油醛自发分解；碘乙酸： 3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制剂；三氯乙酸：蛋白质、酶的变性剂；5% 葡萄糖： 酶作用的底物；干酵母：提供糖酵解所需的酶系。羰基试剂 2,4-二硝基苯肼与 3-磷酸甘油醛在偏碱性条件下反应，生成 3-磷酸甘油醛 -2,4-二硝基苯腙。加过量氢氧化钠即形成棕色复合物，其棕色深度与 3-磷酸甘油醛含量成正比。利用碘乙酸对 3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用，可使 3-磷酸甘油醛不再转化而积累。实验仪器与试剂实验步骤
