精选优质文档-倾情为你奉上制备小鼠骨髓来源巨噬细胞一、 材料1. 6-9周小鼠(GFP+小鼠、野生型小鼠)2. 配制培养液:RPMI 1640培养液+1GlutaMax(Gibco)+10%FBS(热失活)3. 盐溶液:0.9%氯化钠溶液(无菌),储存于4度。4. 纯化的重组M-CSF(CSF-1):到货后灭菌PCR管分装。5. 消毒后的手术器械。6. 70%乙醇溶液。7. 27G针头8. 20ml注射器9. 低绒纸巾10. 100mm培养皿11. 3个50ml离心管二、 方法1. 复温培养液(预添加M-CSF)至37摄氏度。2. 处死小鼠,喷洒70%乙醇溶液消毒。拉扯双侧后腿直至听到清脆响声(提示股骨从髋骨脱臼)。3. 使用干净的剪刀、镊子沿一侧大腿环形剪开皮肤,向爪子方向剥离皮肤。4. 用镊子将腿部肌肉分开,露出股骨和胫骨(注意不要损伤骨头)。5. 切断股骨与髋骨间的韧带,切下膝关节以下的骨头。将股骨和胫骨至于冰冷的盐溶液中。6. 同法处理另一只腿。7. 用低绒纸巾小心剥除骨骼上附着的组织