1、细胞生物学实验海洋科学系刘均玲（ 13698999696）实验一 细胞膜的渗透性一、实验目的与要求1. 掌握细胞膜通透性的实验方法。2. 观察并掌握相对分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质对细胞膜通透性的影响。 细胞膜在不断变化的环境中必须保持自身的稳定状态才能生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻止另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。二、实验原理未溶血 溶血2.血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为 溶血现象 。1. 渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液，使溶液呈现透明即溶血。二、实验原理二、实验原理3.在不同相对分子量、脂
2、溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中， 红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度，从而测量各种物质通透性的差别。三、实验材料、仪器和主要试剂1. 实验材料：鸡 血 。2. 实验器材：小烧杯，试管，试管架，刻度吸管，注射器，秒表等。3. 试剂0.9% 生理盐水；2种低渗溶液： 0.017mol/L氯化钠和 0.032mol/L葡萄糖；10种等渗溶液： 0.17mol/L氯化钠、 0.32mol/L葡萄糖、0.17mol/L氯化铵、 0.17mol/L醋酸铵、 0.17mol/L硝酸钠、 0.12mol/L草酸
3、铵、 0.12mol/L硫酸钠、 0.32mol/L甘油、 0.32mol/L乙醇、 0.32mol/L丙酮。 50% 兔红细胞悬液的制备（制备流程如下） ：以无菌方法抽取鸡静脉血液（ 1 mL兔血加 0.9% 生理盐水 9 mL）混匀，离心（ 3000rpm） 5min弃上清 取沉淀加 0.9% 生理盐水，离心（ 3000rpm） 5min，重复 3次 弃上清 取沉淀，用生理盐水稀释，制成 50% 鸡红细胞悬液备用四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤 溶血现象的观察：取试管 2支，分别加入 0.017mol/L氯化钠和 0.032mol/L葡萄糖低渗溶液 3ml ，再加入 2滴制备好的 50
4、% 鸡红细胞悬液，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的红色悬液变成透明的血红蛋白溶液（红细胞发生破裂，造成 100% 红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液）。四、实验方法与步骤 红细胞的渗透性（ 1）取试管一支，加入 017mol/L氯化钠溶液 3ml，再加入 2滴制备好的 50% 鸡红细胞悬液，轻轻摇动，混匀后静置于温室中，观察试管中发生溶血的时间及其变化。u注意是否有颜色变化？是否有溶血现象？为什么？四、实验方法与步骤（ 2）分别在下列几种等渗溶液中进行实验，步骤同（ 1）。0.32mol/L葡萄糖 0.17mol/L氯化铵 0.17mol/L醋酸铵 0.17mol/L硝酸钠 0.12mol/L草酸铵 0.12mol/L硫酸钠 0.32mol/L甘油 0.32mol/L乙醇 0.32mol/L丙酮
