间接荧光免疫实验 间接荧光免疫实验 2013307341 叶苹苹一、原理 一、原理 根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原 或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用 这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查 细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细 胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧 光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受 激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或 桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织 ,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及 利用定量技术测定含量。二、常见荧光素特性 二、常见荧光素特性 1)FITC :黄色结晶粉末,吸收光:490495nm ,发射 光:520530nm ,明亮的黄绿色荧光。 2)RB200 :橘红色粉末,吸收光570nm ,发射光 595600nm ,橘红色荧光。 3)TRITC :紫红色粉末,吸收550nm ,发射光620nm ,橙红色荧光。 4)镧系:Eu、Tb 5)PE :吸收光490560nm ,发射光595nm ,红色荧光 。 6)其它:酶作用后产生荧光物质。三、分类 三、分类 直接免疫荧光法 间接免疫荧光法四、应用 四、应用 将病毒接到敏感细