精选优质文档-倾情为你奉上（一）细菌基因组DNA的提取1.试剂 1）CTAB/NaCl溶液：4.1g NaCl溶解于80mL H2 O,缓慢加入10g CTAB,加水至100mL。 2）其它试剂：氯仿:异戊醇(24:1)，酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)，异丙醇，70% 乙醇，TE，10% SDS，蛋白酶 K (20mg/mL或粉剂)，5mol/L NaCl。 2.操作步骤：1）100mL 细菌过夜培养液, 5000rpm离心10分钟, 去上清液。 2） 加9.5mL TE悬浮沉淀, 并加0.5 mL 10% SDS, 50 L 20mg/mL(或1mg干粉)蛋白酶 K, 混匀, 37保温1小时。 3）加1.5mL 5mol/L NaCl, 混匀。 4）加1.5mL CTAB/NaCl溶液, 混匀, 65保温20分钟。 5） 用等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提, 5000rpm离心10分钟, 将上清液移至干净离心管。 6）用等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提, 取上清液移至干净管中。7）加1倍体积异丙醇, 颠倒混合
