核酸含量测定 定磷法 1 1核酸定量测定常见的方法 1. 定磷法：将核酸消化，测定其无机磷量，由此计算出核 酸含量，反应灵敏。 2. 紫外吸收法：利用核酸在260nm 处有吸收高峰，操作简 便，受蛋白质和核苷酸的干扰影响。 3. 地衣酚法：用于测定RNA 的含量，RNA 与浓盐酸共热 ，降解形成的核糖转变为糠醛，利用地衣酚反应来测定， 特异性差，戊糖均有此反应。 4. 二苯胺法：DNA 中的脱氧核糖在酸性溶液中转化为- 羟-酮基戊醛，利用二苯胺试剂反应，除脱氧木糖和阿 拉伯糖外其他糖类无此反应。 2 2定磷法的原理 首先将核酸样品用硫酸消化成无机磷，利用定 磷试剂测定无机磷量。反应式为： (NH 4 )MoO 4 +H 2 SO 4 H 2 MoO 4 +(NH 4 ) 2 SO 4 H 3 PO 4 +12H 2 MoO 4 H 3 P(Mo 3 O 10 ) 4 +12H 2 O H 3 P(Mo 3 O 10 ) 4 Mo 2 O 3 MoO 3 （钼蓝） Vit C 3 3还原产物钼蓝在波长660nm 测定 吸光值，当无机磷含量在125g 范围内，光吸收和含磷量成正比。 RNA
