哺乳动物基因组DNA的提取 实验一 储备液的制备 实验二 破碎细胞 实验三 分离、纯化DNA 实验四 琼脂糖凝胶电泳检测DNA * 2003级 分子生物学实验一、实验目的 l 通过本实验了解并掌握提取动物基因组DNA 的原理和步骤。 l 通过本实验熟练掌握琼脂糖凝胶电泳检测 DNA的实验技术。 l 熟练掌握分子生物学实验中各种仪器的使用 方法及试剂的配制方法。 Date 2003级 分子生物学实验二、实验原理 l 天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于 细胞核中。要从细胞中提取DNA时,先把DNP抽提出来 ,再把P除去,再除去细胞中的糖,RNA及无机离子等 。在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞 ,随后用酚抽提,可以得到哺乳动物基因组DNA。 l 用此方法得到的DNA大小为100-150 kb,适用于噬 菌体构建基因组文库和Southern分析。 Date 2003级 分子生物学实验三、仪器、材料和试剂 (一)仪器 高速冷冻离心机、微量取样器、玻璃匀浆器、 琼脂糖凝胶电泳系统:电泳仪、水平电泳槽、 紫外透射仪(或凝胶成像分析系统)、 恒温水浴器、高压灭菌