原位杂交步骤自己整理的精讲(共17页).doc

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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上荧光原位杂交试剂及其配制方法(以下试剂均需用RNase-free水配制):1PBS:NaCl 8gL、KCl 0.2 gL、Na2HPO4 1.44 gL、KH2PO4 0.24 gL,溶于DEPC处理的去离子水中,用pH计测其pH,再用NaOH调其pH为7.4;PBST:PBS加0.1%吐温-20;LiCI:配4M LiCI 100ml需要LiCIH20 25.6g,配好后加入千分之一的DEPC,37,12h放置,高温灭菌。4%多聚甲醛(4%PFA):准确称取40g多聚甲醛,溶于1000ml的1PBS中,避光于摇床(37,160rm)上,待其全部溶解后,用棕色瓶分装成小体积包装,保存于20。(注:本方法与其他一些文献用NaOH和HCl先后调节pH而促其溶解的方法略有不同,因是考虑到pH的稳定性;另外之所以采用上述方法使多聚甲醛缓慢溶解而没有采用文献中提及的用NaOH调节其pH至10促其溶解后再用HCl调节pH的原因,除了用一般的pH试纸测量配置好的4%多聚甲醛的pH不够准确外,也因为

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