生药学及药用植物学实验.DOC

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资源描述

1、生 药 学 及 药 用 植 物 学 实验武汉大学药学院2008.2.211目 录实验须知2第一部分 药用植物学实验2实验一 显微镜的构造和应用和植物细胞的显微结构3实验二 细胞的后含物6实验三 次生分生组织、基本组织和保护组织7实验四 分泌组织、机械组织、输导组织和维管束的类型8实验五 根、茎、叶的形态和根组织特征10实验六 茎、叶组织特征13第二部分 生药学实验15实验七 常用生药的一般性状描述和显微标本的制作15实验八 几种生药的性状与显微鉴别及微量升华法19实验九 生药学综合实验(一):未知粉末及药材的鉴定23实验十 生药学综合实验(二):生药质量标准及质量控制25附录:1. 常用试剂的

2、配制和使用272. 生药的显微化学反应283. 绘图方法与要求314典型花的组成和花序、果实与种子342实验须知实验室规则1 进实验室前,必须预习实验内容,明确实验目的,了解实验的基本原理、内容和方法。2 实验室中应保持安静,不许抽烟,不许大声喧哗,精力要集中,不得擅自离开操作台。3 保持实验室桌面的整洁,爱护显微镜和一切工具,不得随意浪费实验材料和药品。4 实验报告必须在实验室内完成,不得抄袭。每次实验完毕后,切片要从载物台取下,归还切片盒,桌上一切用具应拭洗干净,并归还原处,学生轮流值日,离开实验室前一定要检查门、窗、水、电是否关闭。实验报告的写作法1 按照每次实验报告的要求,在纸上绘图或

3、写成报告。2 绘图时,估计每次实验中需绘图数目的多少,在纸上适当分配绘图位置。3 注意所绘的图与实物大小的比例,绘图时铅笔要预先削尖,线条要用平滑的单线,避免一切模糊、紊乱的线条或阴影。4 绘图时应力求真实,不得抄袭书本或他人作业,字体要端正,图的排列要求整齐清洁,注明各图的名称,并用平行线向右引注各部的名称。3第一部分 药用植物学实验实验一 显微镜的构造和植物细胞的显微结构一、目的要求:1了解显微镜的构造,掌握使用显微镜的方法。2初步掌握植物细胞的基本构造与各种特化细胞壁的鉴别方法。3学习绘生物图。二、实验仪器与材料:1仪器 显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯

4、2试药 蒸馏水、苏丹 III 试液、稀甘油、间苯三酚、浓硫酸3材料 洋葱、女贞叶、豆芽、夹竹桃叶。三、内容与方法:(一)显微镜的构造:机械部分1镜座:显微镜的基底部分,常为马蹄形,用以固定支持全镜。镜柱:连于镜座的直立支持部分。镜壁:装于镜柱上,镜柱与镜壁之间有一倾斜关节,可使镜壁转动,中部稍弯曲,为握取部分,上端与镜筒附着器相连。调节轮:是调节镜筒升降的齿轮,分大小两种,装在镜附着器两旁较大的一对为大调节轮,顺时针(向内)方向转动。镜筒下降。逆时针(向外)方向转动。镜筒上升,旋转一周,可使镜筒升降 10mm 的距离。小调节轮装在大调节轮的下方,旋转一周,只使镜筒升降 0.1mm 的距离。(注

5、意:小调节轮构造精细。不宜转动过多,操作时先用大调节轮调至看到标本后,再用小调节轮调至正确的焦点)。转换器:装在镜筒的下方,具有安装接物镜的孔,转动转换器,可以更换接物镜。载物台:放置标本的方形或圆形平台。中央有一透光孔。台上有压片夹或机械推进器,用以固定和调节玻片的位置。2光学部分:镜筒:为中空的圆筒,以镜筒附着器与镜壁相连,其上端的孔放入接目镜,下端装有转换器。接目镜:装在镜筒的上端,点上刻有 5、10、15 等字样,表示放大倍数。观察时镜中所见的范围,称为视野。4接物镜:装在转换器上,通常有三种,低倍镜(5、8、10、15),高倍镜(40、45、60 等)。油镜( 100)。放大倍数等于

6、接目镜和接物镜放大倍数的乘积。聚光器:位于载物台下方,用以聚集来自反光镜的光线,使照射于标本物体上,聚光器常可上下移动,器中装有虹光圈操纵杆,可使虹彩光圈口径缩小或扩大,以调节光线,光线强时,降低聚光器或缩小光圈,光线弱时上升聚光器或放大光圈。有些显微镜没有聚光器,只有虹彩光圈或以光圈板代替虹彩光圈的。反光镜:为一圆形双面镜,有活动关节,能够转动,用以收集来自不同方向的光线,射于聚光器上,在光线强时使用平面镜,光线弱或用主倍镜时使用凹面镜。(二)显微镜的使用:低倍镜的使用:1从镜箱中取出显微镜时,以右手执镜壁,左手托镜座,镜筒直立向上,将显微镜平置于桌上座位的左前方,距桌旁二寸左右。2旋转转换

7、器,将低倍接物镜对准载物台圆孔,用左眼(右眼也张开)在接目镜上观察,将反光镜转向光镜,并调节光圈,达到视野光线清晰明郎,成为均匀的白光。3用肉眼在玻片标本上找到检视物,然后将玻片标本置于载物台上,使检视物对准透光孔,用压片夹将玻片固定。4从侧面观察物镜与玻片之间的距离,顺时针方向转动大调节轮,使低倍镜几乎到达玻片(切勿使接触,以免损坏镜头及玻片)。然后在接目镜上观察,再慢慢逆时针方向转动大调节轮至看到放大的物象,若所观察部分不在视野中心,则移动玻片,使之适中,转动小调节轮,直至物象最明晰为止。5在视野中看到的是检视物的倒象,因此在移动玻片时要向相反的方向移动。高倍镜的使用:1在低倍镜找到物像后

8、,将需要放大部位移至视野中央。2从侧面观察。转向转换器。转换高倍镜(若物镜太长,则提主镜筒再转换。以免损坏镜头或压破玻片)。这时如果已能看到模糊的物象,则微微转动小调节轮,便可看见清晰的物象。(三)使用显微镜的注意事项:1携镜时,必须右手握紧镜壁,左手托住镜座,切不可一只手提取。2放置显微镜时要轻,勿离桌边太近,镜体的倾斜度不得超过 30,以防止倾倒坠地。3勿使污物,水、药品等沾污镜的各部分。保持显微镜的清洁,不得用手或纱布擦镜头,须用擦镜纸细心抹擦。4观察新鲜材料时,要盖盖玻片;加热的玻片,须放冷后才观察。5用高倍镜时,用毕后,先转开物镜,然后撤除玻片。56显微镜用毕后,撤下玻片。转动转换器

9、,使两物镜呈现“八”字形,然后下降镜筒,使物镜与载物台相接,竖直反光镜,然后放入镜箱。(四)植物细胞的显微结构:将载玻片和盖玻片用纱布拭净,一般以右手的拇指和食指拿纱布。夹住盖玻片的上、下两面来回擦,因盖玻片薄,容易破损,因此用力要轻、要均匀。用吸管吸蒸馏水一滴于载玻片上,然后用镊子从洋葱鳞叶的内侧凹面上撕出表皮一小块,平铺水滴中,材料如有卷曲或重叠,可用解剖针摊平,然后盖上盖玻片,盖盖玻片时,将玻片的一边贴着水滴的边缘慢慢放下,避免产生气泡,此时,水液均匀地充满盖玻片下面的面积,如有过多的水液流出,即用吸水纸吸去如水液太少,不能充满玻片下面的面积,可用滴管从盖玻片边缘小心地渗入少量水液。先在

10、低倍镜下检得,并全面观察,可见众多的表皮细胞整齐排列,再将低倍镜下较清晰部分移至视野中央,然后用高倍镜仔细观察表皮细胞的形态结构。1、洋葱鳞叶表皮细胞的基本结构(1)细胞壁 细胞壁位于细胞的最外圈,由中胶层和初生壁组成。(2)细胞质 细胞质呈一薄层,位于中央液泡与细胞壁之间,半透明,在一般光学显微镜下不易察见。(3)细胞核 细胞核位于细胞质内,注意核的数目和形状。核内有一至多个折光性较强的核仁。(4)液泡 液泡位于细胞的中央,占据细胞腔内较大体积,液泡内充满透明的细胞液,与细胞质难以区分界限。2、细胞壁的特化反应(1)木质化细胞壁:取豆芽,压碎,置载玻片上,加间苯三酚一滴,放置片刻,取盐酸一滴

11、,盖上盖玻片,抹去盖玻片周围的试剂,镜检,可见木质化细胞壁染成红色或红紫色。(2)木栓化细胞壁:取女贞枝条横切一薄片,置载玻片上,加苏丹 III 试液 12 滴,放置 510 分钟(此期间加苏丹 III 2 次)或微微加热,盖上盖玻片,镜检,可见木栓化细胞壁染成橙红色。(3)角质化细胞壁:取夹竹桃叶横切一薄片,置载玻片上,加苏丹 III 试液 12 滴,放置 510 分钟(此期间加苏丹 III 2 次)或微微加热,盖上盖玻片,镜检,可见叶的表皮细胞外被染成橙红色的一薄层,即为角质层。(五)绘生物图基本技巧及注意事项:1绘图前,先将玻片标本观察清楚,根据需要绘图的数量和大小,在图纸上适当安排各图

12、,并留下注字位置,所绘的图不必与所观察的标本大小一致,可视需要,按一定的比例放大或缩小。2用削尖的 2H(或 1H、3H)铅笔,在纸上轻轻绘出图形轮廓,长宽比例,然后用6清楚的、连续的、光滑均匀的线条绘出详细结构,生活部分或明暗之处,可用疏密细圆点表示,不要绘上排线或阴影,打圆点必须将铅笔削尖,不能绘成短线或逗点。3绘图时注意保持纸面的清洁,尽量少用橡皮,绘图纸只绘一面,不要绘两面。4图的各部分名称,一律用铅笔在右方以平行横虚线用正体字注明。四、作业:1绘洋葱鳞叶表皮细胞三个,示明细胞壁、细胞质、细胞核和液泡。2简述几种细胞壁的显微化学鉴别方法。实验二 细胞的后含物一、目的要求:1掌握植物细胞

13、内几种主要贮藏营养物质的形态特征及其检验方法。2熟悉草酸钙晶体的形态特征和类型。二、实验仪器与材料:1仪器 显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯2试药 蒸馏水、95乙醇、稀甘油、稀碘液、- 萘酚、浓硫酸、水合氯醛试液3材料 半夏粉末、川贝粉末、马铃薯块茎、桔梗粉末、小茴香、大黄粉末、甘草粉末、怀牛膝根横切片。三、内容与方法:(一)淀粉粒:取半夏、川贝的粉末少许,分别置载玻片上,用稀甘油或甘油醋酸溶液装片:观察淀粉粒的形状和脐点,并注意辨认单粒、复粒和半复粒。用刀片刮取马铃薯块茎切口上的少许破碎组织或混浊液汁,放在载玻片上,加稀甘油1 小滴,加盖玻片,观察淀粉粒的形

14、状、大小、脐点、层纹、单粒和复粒、滴加稀碘液一滴,观察有何变化?(二)糊粉粒(蛋白质粒):取小茴香种子,剥去种皮,将胚乳徒手切成薄片,放入盛有无水乙醇和乙醚混合液的培养皿中洗涤数分钟(使细胞中的脂肪溶解,以免妨碍糊粉粒的观察)。取出,置载玻片上,加稀碘液一滴,盖上盖玻片,置显微镜下观察,可见被染成淡黄色的众多糊粉粒散布于细胞中,换高倍镜,可见典型的糊粉粒是由一个或几个多边形的蛋白质结晶和 12 个球形的球晶体及无定形蛋白质基质组成。(三)菊糖:取桔梗粉末,用水合氯醛试液装片,置显微镜下观察,可见薄壁细胞内,靠近细胞壁分布有球形,半球形或扇形的菊糖结晶。(四)草酸钙晶体分别作半夏粉末与甘草粉末的

15、水合氯醛透化片。方法:取粉末少许,放在载玻片上,滴加水合氯醛液 2 滴,在酒精灯上徐徐加热到将近沸,加热过程中要避免蒸干,可添加上合氯醛溶液,反复至材料的颜色变得较浅而透明时,停止处理。加稀甘油一滴,盖上盖玻7片,抹去盖玻片周围的试剂,分别观察并记录粉末中所含的针晶与簇晶。取大黄粉末少许,稀甘油装片,观察并记录其细胞中所含簇晶。加 6%醋酸溶液 2 滴,观察晶体有何变化?另取怀牛膝根横切片观察,可见薄壁细胞中有砂晶。四、作业:1绘半夏、川贝、马铃薯的淀粉粒形态图(包括单粒、复粒和半复粒)。2分别绘出半夏、甘草和大黄中所含的晶体图。实验三 次生分生组织、基本组织和保护组织一、目的要求:1掌握基本

16、组织和保护组织的形态特征及其在植物体内存在的部位。2熟悉次生分生组织的形态特征及其在植物体内存在的部位。二、实验仪器与材料:1仪器 显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯2试药 蒸馏水、稀甘油、水合氯醛试液3材料 黄连横切制片、马铃薯块茎制片、厚朴皮横切制片、石菖蒲横切制片、麻黄茎横切制片、薄荷叶横切片,女贞叶、石韦、金银花。三、内容与方法:(一)次生分生组织:1木栓形成层,观察黄连横切制片,可见茎的外层染色较深,为木栓层,其内方有24 层整齐放射排列的细胞(染成橙红色)为木栓形成层区,其中最扁平的一层细胞,细胞壁薄,细胞质浓厚,有的可见细胞核,此为木栓形成层(次生

17、分生组织)它向外分裂产生木栓层,向内分裂产生栓内层(三者合称周皮)。2形成层:观察黄连横切制片,可见韧皮部(染成兰色)和木质部(染成红色)之间有 24 层小而扁平的细胞,排列整齐、紧密,细胞壁薄,此为形成层区(次生分生组织),它向外分裂产生次生韧皮部,向内皮裂产生次生木质部。(二)基本组织:1贮藏薄壁组织:取马铃薯茎横切制片镜检,可见薄壁细胞中含有众多淀粉粒,细胞群为贮藏薄壁组织。2同化薄壁组织:女贞叶徒手切片,用稀甘油装片,镜检,可见叶肉细胞中含有众多叶绿体,为同化薄壁组织。3通气薄壁组织:取石菖蒲根茎横切制片,镜检,可见薄壁细胞作圆链状排列,有大8型细胞间隙,为通气薄壁组织。(三)保护组织

18、:1表皮组织(初生保护组织):观察麻黄茎横切制片,可见最外层细胞排列紧密,整齐、即为表皮、在表皮细胞加厚的外切向壁上染成橙红色者为角质层,起保护作用,有时可见气孔的切面观。2气孔及气孔类型:取薄荷叶横切片,镜检,可见直轴式气孔。3腺毛和非腺毛:取薄荷叶横切片,镜检。腺毛:一为单细胞腺头和单细胞柄,或为多细胞腺头或腺柄。腺鳞:其头大,扁球形,多由 68 个作辐射排列的分泌细胞组成,周围有角质层,其与分泌细胞之间贮有挥发油、柄极短。取石韦生药,用小刀刮取部分表皮组织,装片,镜检,可见星状毛;另取金银花,同法检验,主要为非腺毛。4木栓组织和皮孔,观察厚朴皮横切制片,注意区别木栓层,木栓形成层和栓内层

19、,并找出呈裂隙状的皮孔。四、作业:1绘出薄荷的气孔图。示明气孔轴式,标出保卫细胞和副卫细胞。2绘腺毛、非腺毛和腺鳞。五、思考题:1木栓化细胞壁和角质化细胞壁均被苏丹 III 试剂染成橙红色,你如何区别角质化细胞壁的细胞和木栓细胞?2次生分生组织的形态特点是什么?它存在于植物体的哪些部位?分生组织与植物的生长有何关系?3. 如何区分气孔与皮孔?腺毛和非腺毛?表皮与周皮?实验四 分泌组织、机械组织、输导组织和维管束的类型一、目的要求:1掌握分泌组织、机械组织及输导组织的形态特征。2熟悉外韧型、双韧型、周木型、周韧型、周木型和辐射型维管束。二、实验仪器与材料:91仪器 显微镜、放大镜、镊子、解剖针、

20、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯2试药 蒸馏水、稀甘油、水合氯醛试液、墨汁、间苯三酚、盐酸3材料 生姜、半夏粉末、陈皮横切制片、小茴香果实横切制片、广藿香茎横切制片、肉桂粉末、甘草粉末、合欢皮粉未、黄柏粉末、松茎纵向制片、南瓜茎径向制片、南瓜茎纵切和横切制片、细辛根、人参根横切制片。三、内容与方法:(一)分泌组织1分泌细胞(1) 油细胞:徒手切取鲜姜一薄片,用蒸馏水装片、镜检,可见有些薄壁细胞中含黄色油滴,此为油细胞。(2) 粘液细胞:取半夏粉末少许,加墨汁一滴,盖上盖玻片,镜检,可见粘液呈无色透明块状。粘液细胞中常含草酸钙针晶。其它细胞和细胞后含物均显黑色。2. 分泌腔(分泌囊)

21、:观察陈皮横切制片,可见溶生性分泌腔(油室)。3. 分泌道:(1) 油管:观察小茴香果实横切制片,可见果实由两个分果组成,分果接合面较平坦,有油管两个,分果背而隆起,有脊线(主棱),每两脊线间各有一油管,全部果皮中共有油管 6 个,油管椭圆形,其周围为红棕色扁小的分泌细胞所围绕。(2) 树脂道 观察人参根横切制片,在韧皮部中,有圆形或长圆形树脂道,内含黄色分泌物。(二)机械组织1厚角组织:观察广藿香横切制片,可见表皮下数层细胞的细胞壁在角隔处增厚,为厚角组织。2厚壁组织:纤维:作肉桂粉末的水合氯醛透化片,镜检,其中纤维细胞呈长纺锤形,细胞壁厚,胞腔线形。晶纤维:作甘草的水合氯醛透化片,镜检,可见纤维成束,其周围的薄壁细胞中有草酸钙方晶,此种纤维称晶纤维或晶鞘纤维。石细胞:割取杏仁种皮少许,作水合氯醛透化片,镜检,可见石细胞呈圆形、贝壳形、卵形或椭圆形,壁孔明显,或仅部分细胞壁有孔沟。取黄柏粉末少许,置载玻片上,加间苯三酚一滴,放置片刻,加盐酸一滴,再加甘油一滴,盖上盖玻片,置显微镜下观察,注意有哪些细胞的细胞壁被染成红色?(三)输导组织:1管胞与导管:

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