细菌培养及菌体收集(共7页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上基因工程实验流程参考图：碱变性法提取质粒DNA序列比对以及系统发育树的建立阳性克隆送样测序质粒DNA酶切验证阳性克隆筛选转化E.coli感受态制备PCR产物纯化细菌基因组DNA的16srRNA片段PCR扩增细菌基因组DNA的电泳鉴定细菌基因组DNA的提取与pMD18-T载体的连接确定菌株分类地位细菌培养及菌体收集挑取单菌落于5 ml 2216E培养基中，8培养， 100 rpm转速，振荡120 h后，12 000 rpm离心15 min。弃去上清液，加入10 ml TE洗涤离心后，用10 ml TE溶解菌体，混匀，20保存备用。实验一：菌株基因组DNA的提取 （CTAB 方法）CTAB/NaCL溶液配制：CTAB/NaCL溶液(10% CTAB，0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80