第二节 DNA连接酶 一、DNA连接酶的基本性质 1.修复双链DNA上切口处的磷酸二酯键 43 432.修复与RNA链结合的DNA链上切口处的磷酸 二酯键 一、DNA连接酶的基本性质 44 44一、DNA连接酶的基本性质 3.连接多个平头双链DNA分子:注意: (1)DNA连接酶只能连接相邻核苷酸之间的切口 (nick); (2)如果是缺少一个或几个核苷酸的裂口 (gap),DNA连接酶是无法连接的; 46 46(3)DNA连接酶不能连接两条单链DNA分子或 环化的单链DNA分子,被连接的DNA链必须 是双螺旋DNA分子的一部分; (4)DNA连接酶催化的连接反应是需要能量 的:在大肠杆菌或其他细菌中,利用NAD+ (烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),在动物细胞 中及噬菌体中,利用ATP(腺苷三磷酸)。 注意: 47 47 T4噬菌体DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶 T4噬菌体RNA连接酶 二、DNA连接酶的种类 T4噬菌体DNA连接酶 该酶最早是从T4噬菌体感染的大肠杆菌中提 取的,是T4噬菌体基因30编码的产物,分子量 为68ku,需要ATP作为辅助因子。 两个带有互补粘性末端的双链DNA