质粒DNA的提取及检测实验报告(共9页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上题目:质粒DNA的提取及检测一 实验目的:1. 学习碱裂解法提取质粒的原理和方法;2. 学习DNA琼脂糖凝胶电泳的原理和方法。二 实验原理1. 质粒 (Plasmid): 一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,常常编码一些对宿主有利的酶的基因,这些基因的表型包括抗生素抗性,产生抗生素、限制酶、修饰酶等。2.载体(Vector): 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,转化到细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体。目前除了大肠杆菌中的质粒、噬菌体、M13噬菌体、噬菌粒外,还有酵母人工染色体载体以及动、植物病毒载体等。3. 分离质粒DNA:(1) 培养细菌使质粒扩增;(2) 收集和碱裂解细菌;(3)分离和纯化质粒DNA。4.碱裂解法(1)溶液:50mmol/L葡萄糖,10mmol/EDTA-Na,25mmol/LTris-HC

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