精选优质文档-倾情为你奉上中提质粒步骤材料准备：灭菌250或500mL三角瓶，托盘天平，5mL移液枪及枪头，卫生纸，废液缸，记号笔，50mL圆底离心管，15mL尖底离心管步骤：1. 集菌将100mL菌液分批倒入50mL圆底离心管中，室温12000rpm离心1min，弃流出液体，打开盖倒置吸水纸上控干。2. 加入2.5mL solution I（提前加入RNase，4保存），重悬细菌沉淀（可使用5mL移液枪吹打）。3. 加入2.5mL solution II，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），以获得清亮的裂解物，室温静置3-5min。（此步主要是碱裂解细菌，使其中的蛋白质和DNA变性，反应时间不能太长，否则容易使大肠杆菌的基因组DNA断裂成小片段，污染质粒DNA）4. 加入1.25mL Buffer N3，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），直至形成白色沉淀，室温静置2-3min。5. 4 12000rpm离心10min，使白色沉淀沉于底部。6. 取出一个Lysate Clearance Filter Syringe，抽出活塞，小心将
