细胞培养技术入门 在细胞培养中注意的一些问题 细胞培养的实验程序 细胞的复苏 细胞的计数 细胞(贴壁)的传代培养 细胞的冻存 悬浮细胞的培养方法 在细胞培养中注意的一些问题 环 境 由于体外培养细胞没有抗感染能力 ,若实验者粗心大意,技术操作不规范,也 会导致污染。因而,每一项工作都必须做到 有条不紊和完全可靠,特别是实验环境更为 重要。 1.培养室和超净台的消毒 培养室 无菌培养室每天都要用速消净或0.2的 新洁而灭(苯扎溴铵)拖洗地面一次(拖布要 专用),紫外线照射消毒3050min。 超净工作台 台面每次实验前要用 75 酒精擦洗,然后紫外线消毒30 min。消毒时 工作台面上用品不要过多或重叠放置,否则 会遮挡射线,降低消毒效果。一些操作用具 如移液器、废液缸。污物盒、试管架等用75 酒精擦洗后置于台内同时紫外线照射消毒 。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养 用液同时照射紫外线。2. 培养前准备 在开始实验前要制定好详细的实 验计划和操作程序,有关数据的计算要事 先做好。根据实验要求,准备各种所需器 材和物品、清点无误后将其放置到培养室 、超净台内,然后开始消毒。这样可以避