骨膜蛋白(POSTN)ELISA试剂盒说明书.DOC

上传人:天*** 文档编号:960899 上传时间:2018-11-09 格式:DOC 页数:9 大小:90.50KB
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资源描述

1、骨膜蛋白(POSTN)ELISA 试剂盒说明书本试剂仅供研究使用 标本:体液骨膜蛋白(POSTN)ELISA 试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相 夹心法酶联 免疫吸附实验(ELISA).已知 BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将 BFGF 和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子 ELISA 检测试剂 盒洗涤后,加入 亲和素标记过的 HRP。再经过 温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物 A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜 色的深浅和样品中 BFGF 的浓度呈比例关系。骨膜蛋白(POSTN)ELISA 试剂盒自备材料1蒸 馏 水。2加

2、样 器:5ul 、 10ul、50ul、100ul 、200 、500ul、1000ul。3振 荡 器及磁力 搅拌器等。安全性1避免直接接触 终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体, 请尽快用水冲洗。2 实验 中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3不要用嘴吸取 试剂盒里的任何成份。操作注意事项1 试剂应按标签储 存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2 实验 中不用的板条 应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3不用的其它试剂应 包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4使用一次性的吸 头以免交叉 污染,吸取终止液和底物 A、B 液时,避免使用带金属部分的加样器。5使

3、用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6洗 涤酶标 板时应 充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7底物 A应挥发,避免长时间打开盖子。底物 B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取 OD值。8加入试剂的顺 序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9按照中标明的 时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清- 操作 过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000g 离心 10 分 钟将血清和 红细胞迅速小心地分离。2、血 浆 -EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1

4、000g 离心 30 分钟去除颗粒。3、 细 胞上清液 -1000g 离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。4、保存-如果样品不立即使用, 应将其分成小部分-70 保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在 37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2洗 涤缓 冲液( 50)的稀释:蒸馏水 50 倍稀释。操作步骤1使用前,将所有 试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2根据待测样品数量加上

5、标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3加入稀释好后的 标准品 50ul 于反应孔、加入待测样品 50ul 于反应孔内。立即加入 50ul 的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37温育 1 小时。4甩去孔内液体,每孔加 满洗 涤液,振荡 30 秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5每孔加入 80ul 的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37温育 30 分钟。6甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡 30 秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。如果用洗板机洗

6、涤,洗涤次数增加一次。7每孔加入底物 A、B 各 50ul,轻轻振荡混匀,37温育 10 分钟。避免光照。8取出酶标板,迅速加入 50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9在 450nm 波长处测定各孔的 OD值。局限6 号 标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能1. 灵敏度:最小的 检测浓度小于 1 号标准品。稀释度的线性。 样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为 0.990。2. 特异性:不与其它细胞因子反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于 10%。骨膜蛋白(POSTN)ELISA 试剂盒结果判断与分析1、 仪 器 值:于波 长 450nm 的

7、酶标仪上读取各孔的 OD值2、以吸光度 OD值为纵坐标(Y ),相应的 BFGF标准品浓度为 横坐标(X ),做得相应的曲线,样品的 BFGF 含量可根据其 OD值由标准曲线换算出相应的 浓度。3、检测值范围: 0-800pg/ml4、敏感度: 1.0 pg/mlSP-A 人肺表面活性物质相关蛋白 A 规格: 48T/96T人肺癌标志物 ELISA Kit,48T/96T 人肺癌标志物 ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96TDR-70TM 人肺癌标志物 DR-70 规格: 48T/96TLTA 人非小细胞肺癌抗原 规格: 48T/96TNNE 人非神经元性烯醇化酶 规格:

8、48T/96TNON 人非甲基化寡核苷酸 规格: 48T/96TAhR 人芳香烃受体 规格: 48T/96TE1/UBAE 人泛素激活酶 规格: 48T/96TUb 人泛素蛋白 规格: 48T/96TrT3 人反三碘甲状腺原氨酸 规格: 48T/96TDNM2 人发动蛋白 规格: 48T/96TDPP 人二肽基肽酶 规格: 48T/96T人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶 2 家族肽 B4 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶 2 家族肽B4 规格: 48T/96TSLC/CCL21 人二级淋巴组织趋化因子 规格: 48T/96TDAO 人二胺氧化酶 规格: 48T/96TCA 人儿茶酚胺 规格: 48

9、T/96TPMN Elastase 人多形核白细胞弹性蛋白酶 规格: 48T/96TPMN Elastase 人多形核白细胞弹性蛋白酶 规格: 48T/96TPTN 人多效生长因子 规格: 48T/96TPTN 人多效生长因子 规格: 48T/96Tpoly-IgR 人多免疫球蛋白受体 规格: 48T/96TPHSA 人多聚血清蛋白 规格: 48T/96TPARP 人多聚 ADP 核糖聚合酶 规格: 48T/96TDDC 人多巴胺脱羧酶 规格: 48T/96TDBH 人多巴胺- 羟化酶 规格: 48T/96TD2R 人多巴胺 D2 受体 规格: 48T/96TD1R 人多巴胺 D1 受体 规格

10、: 48T/96TD1R 人多巴胺 D1 受体 规格: 48T/96TDA 人多巴胺 规格: 48T/96TPON 人对氧磷酶 规格: 48T/96TPABA 人对氨基苯甲酸 规格: 48T/96TTE 人端粒酶 规格: 48T/96TTSST-1 人毒性休克综合征毒素 1 规格: 48T/96THDV IgM 人丁型肝炎 IgM 规格: 48T/96THDV IgG 人丁型肝炎 IgG 规格: 48T/96TAZT 人叠氮胸苷 规格: 48T/96TASK-1 人凋亡信号调节激酶 I 规格: 48T/96TFASL 人凋亡相关因子配体 规格: 48T/96TFAS/CD95 人凋亡相关因子

11、规格: 48T/96TAPP 人淀粉样前体蛋白 规格: 48T/96TAmylase 人淀粉酶 规格: 48T/96TETFB 人电子转移黄素蛋白 肽 规格: 48T/96TFAg 人第八因子相关抗原 规格: 48T/96TResistin 人抵抗素 规格: 48T/96THIF-1 人低氧诱导因子 1 规格: 48T/96TLRP-6 人低密度脂蛋白受体相关蛋白 6 规格: 48T/96TLDLR 人低密度脂蛋白受体 规格: 48T/96TLDL-IC 人低密度脂蛋白免疫复合物 规格: 48T/96TLDL 人低密度脂蛋白 规格: 48T/96TLMP7/PSMB9 人低分子质量蛋白 7 规格: 48T/96TLMWH 人低分子肝素 规格: 48T/96TNGF 人的神经生长因子 规格: 48T/96T人的牛血清白蛋白残留检测 ELISA Kit,48T/96T 人的牛血清白蛋白残留检测 ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96TConA 人刀豆素 A 规格: 48T/96TPLP 人蛋白脂质蛋白抗体 规格: 48T/96T

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