粗多糖检测方法(葡萄糖)(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上多糖的检测方法粗多糖的苯酚-硫酸分光光度测定法1.方法提要多糖经乙醇沉淀分离后,去除其他可溶性糖及杂质的干扰,再与苯酚 - 硫酸作用成橙红色化合物,其呈色强度与溶液中糖的浓度成正比,在485nm波长下比色定量。2.仪器(1)离心机:4000r/min。(2)离心管:50ml或具塞15ml。(3)分光光度计。(4)水浴锅。(5)旋涡混合器。3.试剂实验用水为双蒸水,所用试剂为分析纯级。(1) 无水乙醇。(2) 80%(v/v)乙醇溶液。(3) 葡萄糖标准液:准确称取干燥恒重的分析纯葡萄糖0.5000g加水溶解,并定容至50ml,此溶液1ml含10mg葡萄糖,用前稀释100倍为使用液(0.1mg/ml)。(4) 5%苯酚溶液(W/V):称取精制苯酚5.0g,加水溶解并稀释至100ml,混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。(5) 浓硫酸(比重1.84)。(6) 0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.5):31.5ml(0.2mol/L)磷酸氢二钠与68.5ml(0.2mol/L)磷酸二氢钠混

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