质粒的转化及转染(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上质粒的转化转化(transformation)是某一的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。这现象首先发现于细菌,也是细菌间转移的多种形式中最早发现的一种;转化的研究不但在理论上有重要意义,而且在中是将或病毒载体引入宿主细胞的一种重要手段。质粒转化的目的:将质粒转入细菌内以便获得更多的质粒,达到扩增的目的。质粒转化操作步骤:(热激法)1、从80冰箱中取出感受态的细菌在冰上融化。(感受态下的细菌更容易接受外源性的DNA)2、打开大实验室(千万不可拿进细胞房,天敌)的细菌专用超净操作台的紫外灯灭菌10min。3、打开水浴锅加热,温度设置为42。4、取若干EP管,标记后,每EP管中加入50L的菌液。如質粒難抽,則加大用量。5、每EP管加入2.5L的质粒后打匀,动作要轻柔,感受态细菌比较脆弱。6、将EP管放在冰上孵育25min。7、将EP管插入浮萍放入42水浴锅加热60s(要求时间绝对精确)。8、将EP管插入冰块90s。9、每E

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