精选优质文档-倾情为你奉上高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因一、实验目的1、学习高效液相色谱仪的操作。2、了解高效液相色谱法测定咖啡因的基本原理。3、掌握高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法。二、实验原理咖啡因又称咖啡碱,是由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱,它属黄嘌呤衍生物,化学名称为1,3,7-三甲基黄嘌呤。咖啡因能兴奋大脑皮层,使人精神兴奋。咖啡中含咖啡因约为1.21.8%,茶叶中约含2.04.7%。可乐饮料、APC药片等中均含咖啡因。其分子式为C8H10O2N4,结构式为:定量测定咖啡因的传统分析方法是采用萃取分光光度法。用反相高效液相色谱法将饮料中的咖啡因与其它组分(如:单宁酸、咖啡酸、蔗糖等)分离后,将已配制的浓度不同的咖啡因标准溶液进入色谱系统。如流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的,测定它们在色谱图上的保留时间tR和峰面积A后,可直接用tR定性,用峰面积A作为定量测定的参数,采用工作曲线法(即外标法)测定饮料中的咖啡因含量。三、仪器和试剂1、Agilent 1100高效液相色谱仪或上海通微EasySep