1、“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org1教材经典实验归类一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA遇甲基绿呈绿色，RNA可被吡罗红染成红色。实验步骤步骤 器材与试剂 作用与原理（1）制片将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴载玻片烘干1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，维持细胞形态。2 烘干使细胞固定在载玻片上（2）水解8%HCl中30保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。（3）冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟（4）染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色吡罗红使
2、RNA染上红色（5）观察 显微镜下观察实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色。分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA ；RNA主要分布在细胞质中。二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 实验原理：可溶性糖中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖） ，与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色的沉淀。脂肪可以被苏丹染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。1还原糖的检测还原性糖：有还原性基团游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖。（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙
3、液： 0.05g/mL的CuSO4溶液） ，现配现用。（3）步骤：取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）水浴加热2min左右观察颜色变化（浅蓝色棕色砖红色）2脂肪的检测（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。（2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央染色（滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精）制作装片（滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片） 镜检鉴定（显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.o
4、rg23蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A 液：0.1g/mL的NaOH 溶液，B液：0.01g/mL 的CuSO 4溶液）（2）步骤：试管中加样液2mL 加双缩脲试剂A 液1mL，摇匀 加双缩尿试剂B液4滴，摇匀 观察颜色变化(紫色)三显微镜的使用1显微镜的使用：取镜 安放 对光 压片 观察 收镜。（1）低倍镜使用：（观察任何标本都必须先用低倍镜，且标本应透明）（2）高倍镜使用：先使用低倍镜确定目标移动装片，使目标位于视野中央转动转换器，换用高倍镜调焦（转动细准焦螺旋）(视野较暗，可调反光镜或光圈)四用高倍镜观察线粒体和叶绿体 1材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片2原
5、理：叶绿体在显微镜下观察，绿色，球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色，细胞质接近无色。步骤 操作方法 目的与作用（1）取材 新鲜的藓类的叶菠菜叶下表皮略带一些叶肉藓类叶为单层细胞下表皮容易撕取，要略带些叶肉（2）制片 注意叶片不能太干了，保持有水的状态 以免影响细胞活性（3）观察 叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积（长轴）转向光源，在强光下以最小面积（短轴）转向光源。（1）取材 漱口，口腔内侧壁上轻刮几下（2）染色 将口腔细胞放在健那绿液滴上（3）观察 盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色问题1为什么不用植物细胞来观察线粒体？植物
6、线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。2如果观察发现染色不足，如何补色？在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸。五探究影响酶活性的因素原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。1材料：新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。2步骤：（1）探究温度对酶活性的影响步骤 项目 试管1 试管2 试管31 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL2 放置在不同温度环境下5分钟 0 100 60“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org33 加入新配置的淀粉酶溶液 1mL 1
7、mL 1mL4 滴入碘液 2滴 2滴 2滴5 观察结果 变蓝 变蓝 不变蓝在温度对酶活性的影响的实验中，三支试管的条件，除温度外均相同。3号试管处在60的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝；2号试管的温度条件是100， 这样高温度条件下，淀粉酶已失去活性；1号试管的温度条件是O，低温抑制淀粉酶的活性。所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解，滴上碘液后都会变蓝，此实验可以证明；酶的催化作用需要适宜的温度条件，温度过高和过低都将影响酶的活性。（2）探究pH对酶活性的影响实验1 过氧化氢（H 2O2）在过氧化氢酶的催化作用下，可以分解成水和氧气，可以放入带火星的木条，看能
8、否复燃来检测是否有氧气产生。步骤 项目 试管1 试管2 试管31 加入过氧化氢溶液 2mL 2mL 2mL2 加入蒸馏水 1mL 3 加入盐酸溶液 1mL 4 加入NaOH溶液 1mL5 滴加肝脏研磨液 2滴 2滴 2滴6 37水浴 5min 5min 5min放入带火星的木条 复燃 不复燃 不复燃7 检验试管内气泡产生量 有气泡产生 没有气泡产生没有气泡产生2号试管内加入了盐酸，溶液的pH 较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH 较高，在过低或过高pH环境中，过氧化氢酶失去活性，不能使过氧化氢分解，没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱，溶液近似中性，过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气，使
9、木条复燃。实验2 原理：淀粉在淀粉酶的作用下，被分解成麦芽糖，麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色沉淀。步骤 项目 试管1 试管2 试管31 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL2 加入蒸馏水 1mL 3 加入盐酸溶液 1mL 4 加入NaOH溶液 1mL5 加入新配置的淀粉酶溶液 2滴 2滴 2滴6 60水浴 5min 5min 5min7 加入斐林试剂 2mL 2mL 2mL8 5060水浴 2min 2min 2min9 观察结果 有砖红色沉淀 无 无“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org4实验现象记录如下：1号试管有砖红色沉淀生成，2号试管无砖红
10、色沉淀生成，3号试管无砖红色沉淀生成。2号试管内加入了盐酸，溶液的pH 较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH 较高，在这样的pH环境中，淀粉酶失去活性，不能使淀粉分解，所以试管中加人斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。1号试管内没有加入酸或碱，溶液近似中性，这样的pH 适于淀粉酶发挥催化作用，所以淀粉被分解并与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。以上实验可以证明，酶的催化作用需要适宜的pH、pH 偏低或偏高都能影响酶的活性。六观察植物细胞的质壁分离和复原（一）质壁分离原理：细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞吸水；细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞失水 细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。1条件：细胞内外溶液
11、浓度差，活细胞，大液泡2材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡） ，质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。3步骤： 制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观察盖玻片一側滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引观察(液泡由大到小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离)盖玻片一側滴清水， 另一側用吸水纸吸引观察(质壁分离复原)4结论：细胞外溶液浓度 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离细胞外溶液浓度 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原（二）植物细胞质壁分离和复原1原理：成熟（有明显液泡）的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统，通过渗透作用的方式吸水或失水。2.应用：（1）可以用于测定细胞液的浓度 （2
12、）可以用于判断细胞的死活3.注意问题：（1）细胞发生质壁分离后，细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL 蔗糖溶液。（2）动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。注意事项：1.选材：选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。其细胞液为紫色，在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分，观察到的质壁分离和复原效果明显。另外，取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。2.试剂：选用0.3g/ml 蔗糖糖溶液。浓度过高，细胞质壁分离速度虽然很快，但不久就会将细胞杀死，细胞不能进行质壁分离复原；若浓度过低，则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。另外，8% 食盐溶液、5% 的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油等也可使用
13、，但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。3.时间的控制：做好质壁分离的实验后，不久就要做质壁分离复原实验。避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中，细胞过度失水而导致死亡。从而观察不到质壁分离复原的现象。七叶绿体色素的提取和分离1原理：( 1 ）叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇（或丙酮）中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。（ 2 ）不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org5快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素分离。2步骤：3结果分析：从色素带
14、的宽度可知色素含量的多少依次为：叶绿素a 叶绿素b 叶黄素 胡萝卜素； 从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是：胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b ； 在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 与叶绿素b ，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。4实验创新：在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的提取液进行层析，会得到近似同心的四个色素环，由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。八探究酵母菌的呼吸方式1 原理： 酵母菌在有氧件下进行有氧呼吸，产生二氧化碳和水：C6H12O6 6O 2 6H 2O 6CO2 12H 2O 大量能量在无氧条件下进行无氧呼吸，产生酒精和少量二氧化碳：
15、C6H12O6 2C2H5OH 2CO 2 少量能量2装置：下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图，请据图分析甲：有氧呼吸装置 乙：无氧呼吸装置A瓶加入的试剂是NaOH ，其目的是：使进入B 瓶的空气先经过NaOH处理，排除空气中CO 2对实验结果的干扰。C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水（或溴麝香草酚蓝水溶液） ，其作用是：检测CO2的产生D瓶应封口放置一段时间后，再连通 E瓶，其原因是：D 瓶应封口放置一段时间后，酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。再连通E瓶，就可以确保通入澄清石灰水（或溴麝香草酚蓝水溶液）的CO 2是酵母菌的无氧呼吸所产生的。“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.
16、fjjy.org63检测：（1）检测CO 2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。（2）检测酒精的产生：橙色重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。九 观察细胞的有丝分裂1材料：洋葱根尖（葱，蒜）2步骤：（一）洋葱根尖的培养（二）装片的制作 制作流程：解离 漂洗 染色 制片1解离：药液： 质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精(1 ：1混合液)。时间：35min；目的：使组织中的细胞相互分离开来。2漂洗：用清水漂洗约3min。 目的：洗去药液，防止解离过度，并有利于染色。3染色：用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液
17、(或醋酸洋红液)染色35min 目的： 使染色体着色，利于观察。4.制片： 将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片，然后用拇指轻轻地按压载玻片。目的：使细胞分散开来，有利于观察。（三）观察1先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。2换高倍镜下观察：分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。 （注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点） 。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。十模拟探究细胞表面积与体积的关系原理： NaOH和酚酞相遇呈紫红色当与琼脂相遇时，其中酚酞变成紫红色，因此，从颜色上的变化就知道NaOH扩散得有多远。在
18、一定时间内，NaOH在琼脂块的每一侧扩散的距离大致相同。步骤： 将含酚酞琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体， 放入烧杯内，加入NaOH溶液，10min后取出，用纸巾吸干，用塑料刀将琼脂块切成两半 。观察切面，测量每一块上NaOH扩散的深度。分析： 琼脂块的表面积与体积之比（相对表面积）随着琼脂块的增大而减小， NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比也随着琼脂块的增大而减小。结论：细胞体积越大，其相对表面积越小，细胞的物质运输的效率就越低。细胞表面积限制了细胞的长大。1细胞为什么要分裂？或细胞为什么这么小？（1）增大细胞膜表面积与体积比，有利于物质的运输（营养吸收与废物排出
19、）以保证细胞正常生命代谢需要。（2）保证适宜的核质关系，使细胞质能在细胞核的控制范围内。2卵细胞是一种特殊的细胞，因为它含有许多供胚胎发育的营养物质卵黄，而使细胞体积增大了许多倍。但卵细胞一般与外界交换物质少，故表面积与体积的比例特殊。十一性状分离比的模拟实验模拟原理 进行有性杂交的亲本，在形成配子时，等位基因会发生分离；受精时，雌雄配子又会随机结合成合子。因此，杂合子杂交后发育成的个体，一定会发生性状分离。“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org7模拟程序 两种颜色小球各 10 个，分别置于两桶内分别从两桶随机抓小球，记录放回、再抓重复 50 100 次统计DD、Dd、
20、dd 的数量计算数量比。十二种群密度的取样调查（1）实验原理 种群密度是指单位空间内某种群的个体数量。研究者通常只计数种群的一小部分，用来估算整个种群的种群密度，即取样调查法。实际操作时往往随机选取若干个样方，通过计算每个样方的种群密度，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。（2）实验步骤 确定调查对象选取样方计数计算种群密度十三观察细胞的减数分裂1目的要求：通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。2材料用具：蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，显微镜。3方法步骤：（1）在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别初
21、级精母细胞次级精母细胞和精细胞。（2）先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。十四低温诱导染色体加倍1原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。2方法步骤：（1）洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内（4） ，诱导培养36h。（2）剪取诱导处理的根尖约0.51cm，放入卡诺氏液中浸泡0.51 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗 2次。（3）制作装片：解离漂洗染色制片（过程同观察细胞
22、的有丝分裂的制片方法一样）（4）观察，比较：视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目发生改变的细胞。十五调查常见的人类遗传病1要求：（1）调查的群体应足够大；（2）选取群体中发病率较高的单基因遗传病。如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等。 （3）如果调查某病的遗传方式，则要对患病的家族群体进行调查统计。2方法：保证调查的群体足够大，组调查，汇总数据，统一计算。步骤：组织问题调查小组 确定课题 分头调查研究 撰写调查报告 汇报、交流调查结果。3计算公式：某种遗传病的发病率= 发病人数/调查人数 100%4讨论：所调查的遗传病的遗传方式，发病率是否与有关资料相符，分析原因。十六设计并制
23、作生态瓶，观察生态系统的稳定性1实验原理 生态系统的稳定性与它的物种组成、营养结构和非生物因素等都有密切关系。2实习方法 设计实验制作小生态瓶每天观察记录注意：（1）生态瓶必须密封、透明“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org8（2）生态瓶的水量应占其容积的 45，要留出一定的空间，储备一定量的空气。“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org91。颜色反应总结 待鉴物质 使用试剂 颜色反应 待鉴物质 使用试剂 颜色反应淀粉 碘 蓝色 DNA 甲基绿 绿色还原糖 斐林试剂班氏试剂砖红色沉淀RNA 吡罗红 红色脂肪 苏丹苏丹橘黄色红色CO2 澄清 Ca（O
24、H） 2溴麝香草汾蓝水溶液变浑浊蓝变绿再变黄蛋白质 双缩脲 紫色 酒精 酸性重铬酸钾溶液灰绿色线粒体 健那绿 蓝绿色 染色体 碱性染料 深色2显微镜使用注意事项（1）成像特点：放大倒立的虚像。（2）放大倍数计算：物镜的放大倍数目镱的放大倍数。放大倍数指的是物体的长或宽。（3）物像的移动方向与装片的移动方向相反。（4）低倍镜下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。（5）物镜和目镜的判断方法：物镜有螺纹，目镜无螺纹。（6）放大倍数的判断方法：目镜：镜头长放大倍数小，镜头短放大倍数大。物镜：镜头长放大倍数大，镜头短放大倍数小。物镜与装片之间的距离：距离近
25、放大倍数大，距离远放大倍数小。（7）显微镜的有关性能参数。最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。高倍镜的使用时注意（1）低倍镜使用过程中，下降镜筒时必须双眼侧视镜筒，防止镜头撞到玻片。（2）低倍镜找到物像后，换上高倍镜时，观察过程中只能使用细准焦螺旋。3叶绿体中色素的提取与分离试验有关事项(1）色素分离和提取的原理经常考察，易混淆。(2）在研磨时加入碳酸钙的作用是防止色素被破坏，加入二氧化硅的作用是有助于研磨。过滤时用的是单层尼龙布。(3）画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。 (4）研磨要迅速、充分。 a因为丙酮容易挥发； b为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素； c叶绿素极不稳定
26、，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。 (5）制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结。（6）放置滤纸时，滤液细线必须在层析液上面。 核心考点整合“高中生物颖韬工作室”整理 http:/sw.fjjy.org101斐林试剂和双缩脲试剂 斐林试剂和双缩脲试剂都由溶液和溶液组成，但二者有如下三点不同： （1）溶液浓度不同 斐林试剂中溶液称为斐林试剂甲，其浓度为溶液称为斐林试剂乙，其浓度为；双缩脲试剂中溶液（双缩脲试剂A）的浓度为，溶液（双缩脲试剂B）的浓度为。 （2）使用原理不同 斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀
27、，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀） 。 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。 （3）使用方法不同 斐林试剂使用时，先反溶液和溶液混合（将滴溶液滴入溶液中） ，而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入溶液（2mL） ，振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入34滴溶液，振荡摇匀后观察现象。2。影响
28、酶活性的几个相关曲线酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比，如下图所示。底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎：成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著；当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。如下图所示。pH对酶促反应的影响 温度对酶促反应的影响总结：酶的催化效率受多种因素影响；其中过酸过碱，高温能够使酶的空间结构遭到破坏，从而使酶失活。 总结提升
