PCR技术的原理及其应用PCR技术简史 最早，Korana于1971年提出核酸体外扩增的设想：“经 过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物， 并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明 了聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制，只是在试 管中给DNA的体外合成提供一种合适的条件模板DNA，寡 核苷酸引物，DNA聚合酶，合适的缓冲体系，DNA变性、复 性及延伸的温度与时间。 1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌 (thermus aquaticus) 中提取到一种耐热的DNA聚合酶。此 酶耐高温，并提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了 扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而 其灵敏性也大大提高。此酶的发现使PCR技术被广泛的应用 。1. PCR技术的基本原理 PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成： 模板DNA的变性：即在高温（93左右）下，待扩增的 靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板； 模板DNA与引物的退火(复性)：在低温（3755）情况 下，
