透明质酸酶抑制实验(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上Elson-Morgan 改良法一、实验原理 透明质酸酶是型过敏反应的参与者,透明质酸酶与炎症、过敏有强相关性,研究报道各种肥大细胞释放组胺的药物能调节透明质酸酶活性,一些抗敏药物有强抑制透明质酸酶活性,因此抑制透明质酸酶活性作为研究抗过敏作用的指标。二、试剂和仪器1、透明质酸酶:浓度500U/ml,现配现用,不能过夜,用醋酸缓冲液做溶剂;2、透明质酸钠:0.5mg/ml,一次配制,多次使用,用醋酸缓冲液做溶剂;3、Buffer:溶液A(0.2 mol/L 醋酸 11.55ml冰醋酸溶于1L蒸馏水中)4.8ml 溶液B(0.2 mol/L醋酸钠 16.4g无水醋酸钠或27.2g三水合醋酸钠溶于1L蒸馏水中)45.2ml,混合稀释至100ml,配制成PH=5.6的醋酸缓冲液;4、乙酰丙酮溶液:50ml 1.0mol/L 碳酸钠溶液和3.5ml乙酰丙酮溶液混合均匀(临用现配)5、P-DAB显色剂:0.8g 对二甲氨基苯甲醛溶于15ml浓盐酸和15ml无水乙醇混合均匀。6、氯化钙溶液CaCl

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