双荧光素酶报告系统报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的 蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容 易被鉴定的基因。 一般的，把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融 合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，从而利用它 的表达产物来标定目的基因的表达调控。 u在动物基因表达调控的研究中，报告基因被广泛应用。如 绿色荧光蛋白(GFP）和荧光素酶。 一、概述荧光素酶（Luciferase）：是能够催化不同底物氧化 发光的一类酶的统称，哺乳细胞无内源性荧光素酶。 荧光素酶报告基因的优点 u蛋白不需要翻译后加工，所以一旦翻译立即产生报告活性 。 u在所有的化学发光反应中，它的光产物具有最高的量子效 率，因而非常灵敏。另外，在宿主细胞及检测试剂中均检 测不到背景发光。 u检测快速，每个样品只需几秒钟。 构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞， 适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶 活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响 。 二、实验原理 利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特性，把感兴趣 的基因转录的调控元件克隆在萤火虫
