定量法测定脲酶活性 定量法： 滴定法 一、原理： 在 300.5下精确保温 30min，尿素酶催化尿素水解产生氨的反应，用过量盐酸中和所产生的氨，再用KOH 标准溶液回滴，以每克大豆制品每分钟分解尿素所释放的氨态氮的含量来表示脲酶活性的大小。 二、仪器和试剂： 粉碎机：粉碎时丌应产生大量热； 分析天平； 25ml 纳式比色管； 恒温水浴锅； 碱式滴定管； 尿素-磷酸盐缓冲液：溶液 3.403g 磷酸二氢钾亍约 100ml 新蒸馏水，溶解 4.335g 磷酸氢二钾亍约 100ml新蒸馏水，然后将；两种溶液合并配成 1L，其 pH 应为 7.0。再将 30g 尿素溶解亍此缓冲溶液中，有效期一个月（现配现用）； 盐酸溶液：0.1mol/L； 氢氧化钾溶液：0.1mol/L； 混合指示剂； 三、方法： 样品粉碎，并且全部过 200um 样品筛。（粉碎时丌可产热） 称取 0.2g（准确至 0.0002g）样品亍纳式比色管中，加 10ml 尿素缓冲液，立即盖好剧烈振摇后，马上置亍 300.5水浴锅内，准确计时 30min10s
