基因诊断、PCR 、测序等介绍 罗俊明 2013 年6 月PCRPCR 技术 l 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction) 简称PCR ，是一项在短时间内采 用两引物大量扩增特定的DNA 片段的分子 生物学技术。 l 每个循环之后，模板量为原来的2 倍。它可 将极微量的靶DNA 特异地扩增上百万倍。PCR 原理 阈值线（Threshold ） 基线以上，阴性对照以上，与对数期 相交，尽可能靠近基线。 基线（Baseline ） 本底，无扩增区域，一般为315Ct值 之间 Ct 值 荧光信号开始由本底进入指数增长阶 段的阈值所对应的循环次数。PCR 原理 Y=AX+B 线性的一次方程直线。 常用指标有斜率(A) ，截距(B) ，相关系数(R) 一般A 在-3.5-2.8 之间，B 在44 ，R 无限接近于1 ，0.95PCR 原理 PCR原理实质就是体外基因复制技术 Mg 2+ dCTP dGTP dUTP dATP Taq DNA聚合酶 AmpErase Primer 靶序列 加热变性95 C 靶序列引物退火55 C 引物延伸72 C 双链解开 引物与单链结合
