链霉菌RNA提取(共4页).doc

上传人:晟*** 文档编号:9755878 上传时间:2021-12-18 格式:DOC 页数:5 大小:27KB
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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上5.5.10 转录谱的测定5.5.10.1 链霉菌总RNA的提取液体培养基中生长的菌体经离心收集并用吸水纸洗干(固体培养时,应在培养基表面铺上玻璃纸,刮取生长在玻璃纸表面的菌体),迅速放入用液氮预冷的研钵中,研磨至粉末状; 取50-100 mg菌体放入预冷的无RNase污染的离心管中(15磅灭菌1小时),迅速加入1 ml Trizol试剂,用微量移液器吹匀并在振荡器上振荡2分钟,室温放置5分钟后12,000 g,4C离心10 min; 将上清转移至一新的离心管中,加入200 ml氯仿,充分混匀,室温放3分钟后于12,000 g,4C离心15 min; 将上清转移至一新的离心管中,再加入200 ml氯仿抽提一次,12,000 g,4C离心10 min; 将上清转移至一新的离心管中,加入500 ml异丙醇,-20C或-70C沉淀30 min,12,000 g,4C离心10 min; 弃上清,加入1 ml 70乙醇洗两次,室温干燥后加入适当体积的DEPC处理过的H2O溶解,-70C冻存,或用甲酰胺

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