逆转录 - 实时荧 光定量PCR ( RT- )qRT-PCR (RT- )qRT-PCR (Reverse transcription ) quantitative real time PCR RT-PCR Reverse transcription-PCR Real-time PCR样品处理 RNA提取 及逆转录 qPCR 数据分析样品处理 细菌样品 收集1-5*10 9 细菌,置于液氮 研磨,加入1mL Trizon ,混匀,高温(55) 细胞样品 收集1-5*10 7 细胞,加入1mL Trizol,混匀,进行RNA提取或者放置于-80 冰箱 动物样品 取50-100mg组织(新鲜或-70 及液氮中保存的组织均可)置1.5 mL离心管中,加入 1ml Trizol充分匀浆。RNA提取及反转录 将处理好的样品置于室温,静置5 min 加入0.2mL氯仿,振荡15s,静置5 min 4离心,12000g15min,取上清 加入等体积异丙醇,将管中液体轻轻混匀,室温静置10min 4离心,12000g10min,弃上清 加入1ml 75%乙醇,轻轻洗涤沉淀。4,7500g5min ,