乳糖检测方法 附 录 A (规范性附录) 乳糖的测定 A.1 原理 牛乳或乳粉样液经沉淀剂澄清后,样液中的乳糖在苯酚、氢氧化钠,苦味酸和硫酸氢钠作用下,生成桔红色的络合物。在波长 520nm 处具有最大的吸收波长,颜色的深浅与乳糖含量成正比,由标准乳糖含量可以计算出样液中乳糖含量。 A.2 试剂 A.2.1 沉淀剂 4.5%氢氧化钡溶液、5%硫酸锌溶液。 A.2.2 发色剂 1%苯酚溶液、5%氢氧化钠溶液、10%苦味酸溶液、1%亚硫酸氢钠溶液,按次序以 1:2:2:1( V / V )配成,保存于棕色瓶中,有效期两天。 A.2.3 乳糖标准溶液: 称取含有结晶水的乳糖(C 12 H 22 O 11 H 2 O)1.052g 或经 100烘至恒重干燥的乳糖 1g,经水解后移入 1L 容量瓶中,并用水稀释至刻度,此溶液每毫升含有 1mg 的乳糖。 A.3 仪器 A.3.1 分光光度计。 A.3.2 离心机。 A.4 样品处理 准确吸取2.0mL(或2.00g)牛乳或1.00g乳粉,用水溶解后移入100