1、 北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 1亮氨酸项目可行性研究报告中文学名：亮氨酸、白氨酸中文别名：-氨基-甲基戊酸、-氨基异己酸英文名：Leucine化学式：C6H13NO2分子式：(CH3)2CHCH2CH(NH2)COOH分子量：131.18类别：氨基酸类药本品为 L-2-氨基-4- 甲基戊酸。按干燥品计算，含 C6H13NO2不得少于 98.5%。外观与性状：本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。熔点：332（消旋体） ，293295（左旋体）酸碱性：pH 约为为 5.5 6.5溶解性：本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在
2、乙醇或乙醚中极微溶解。相对密度（水=1）：左旋体 1.293比旋度：取本品，精密称定，加 6mol/L 盐酸溶液溶解并释稀成每 1ml 中含 40mg 的溶液，依法测定（附录 E） ，比旋度为+14.5至+16.0。储存注意事项：本品应密封干燥避光保存。性状检验北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 2溶液酸度测定：取本品 0.50g ，加水 50ml，加热使溶解，放冷至室温，依法测定（附录 H） ，pH 值应为 5.5 6.5 。溶液透光度测定：取本品 0.50g ，加水 50ml，加热使溶解，放冷至室温，照分光光度法（附录 A）
3、 ，在 430nm 的波长处测定透光率，不得低于 98.0%。氯化物检验：取本品 0.25g ，依法检查（附录 A） ，与标准氯化钠溶液 5.0ml 制成的对照液比较，不得更浓 （0.02%） 。硫酸盐检验：取本品 1.0g，依法检查（附录 B） ，与标准硫酸钾溶液 2.0ml 制成的对照液比较，不得更浓（0.02%） 。铵盐检验：取本品 0.10g ，依法检查（附录 K） ，与标准氯化铵溶液 2.0ml 制成的对照液比较，不得更浓（0.02%） 。重金属检验：炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录 H第二法） ，含重金属不得过百万分之十。砷盐检验：取本品 2.0g，加水 5ml，加硫酸 1m
4、l 与亚硫酸10ml，在水浴上加热至体积约剩 2ml ，加水 5ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，加盐酸 5ml ，加水使成 28ml，依法检查（附录 J 第一法） ，应符合规定（0.0001%） 。其他氨基酸测定：取本品，加水制成每 1ml 中含 4mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加水释稀成每 1ml 中含20g 的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述两种溶液各 5l ，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 3丁醇水冰醋酸（3:1:1 ）为展开剂，
5、展开后，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液（1 50） ，在 80干燥 5 分钟，立即检视，供试品溶液所显杂质斑点的颜色，与对照溶液的主斑点比较，不得更深（0.5 %） 。干燥失重：取本品，在 105 干燥 3 小时，减失重量不得过0.2 %（附录 L） 。炽灼残渣：取本品 1.0g，依法检查（附录 N） ，遗留残渣不得过 0.1 %。 铁盐 取本品 1.5g ，依法检查（附录 G） ，与标准铁溶液 1.5ml 制成的对照液比较，不得更深（0.001%） 。热原测定：取本品，加氯化钠注射液制成每 1ml 中含 20mg 的溶液，依法检查(附录 D)，剂量按家兔体重每 1kg 注射 10ml，应符合规定
6、（供注射用） 。含量测定取本品约 0.1g，精密称定，加无水甲酸 1ml 溶解后，加冰醋酸25ml，照电位滴定法（附录 A） ，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于 13.12mg 的 C6H13NO2。方法名称： 亮氨酸测定电位滴定法应用范围： 本方法采用滴定法测定亮氨酸的含量。本方法适用于亮氨酸 。方法原理： 供试品置锥形瓶中，加无水甲酸与冰醋酸溶解后，北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 4照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定
7、。读出高氯酸滴定液使用量，计算亮氨酸的含量。试剂：1.水（新沸放置至室温）2.高氯酸滴定液（0.1mol/L）3. 结晶紫指示液4. 无水甲酸5 .冰醋酸6. 基准邻苯二甲酸氢钾仪器设备： 电位滴定仪试样制备：高氯酸滴定液（0.1mol/L）配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每 1g 水加醋酐 5.22mL)750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐 23mL，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成 1000mL，摇匀，放置 24 小时。若所测供试品易乙酰化，则须用水份测定法测定本页的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为 0.01%-0.
8、2%。标定：取在 105干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约 0.16g，精密称定，加无水冰醋酸 20mL 使溶解，加结晶紫指示液 1 滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1mL 高氯北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 5酸滴定液（0.1mol/L）相当于 20.42mg 的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度，即可。贮藏：置棕色玻璃瓶中，密闭保存。结晶紫指示液取结晶紫 0.5g，加冰醋酸 100mL 使溶解，即得。操作步骤： 精密称取供试品约 0.1g，置锥形瓶中，加无水
9、甲酸 1mL 溶解后，加冰醋酸 25mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。记录消耗高氯酸滴定液的体积数（mL） ，每 1mL 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于13.12mg 的 C6H13NO2。注 1：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一,“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005 年版，二部，p.445。制备方法氨基酸的制造是从 1820 年水解蛋白质开始的。1908 年日本人Ikeda 发现谷氨酸钠是鲜味的强化剂
10、，开始了工业化生产氨基酸的历史。1957 年日本开始运用微生物进行谷氨酸发酵生产，从此揭开了微生物发酵方法生产氨基酸的历史新篇章。20 世纪六十年代左右，关于 L 一亮氨酸生物合成以及其代谢调节机制相继阐明。这为微生北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 6物发酵法生产 L 一亮氨酸定向育种及酶法生产 L-亮氨酸提供了理论基础。L 一亮氨酸的生产方法主要有提取法、化学合成法、酶催化法、微生物发酵法等。蛋白质水解法氨基酸是蛋白质的组成单位，在酸性条件下，将 L 一亮氨酸含量较高的蛋白质水解，得到各种氨基酸的混合物，经分离、纯化、精致等
11、工序获得 L 一亮氨酸产品。我国大部分厂家采用蛋白质水解法生产 L 一亮氨酸和 L-胱氨酸。蛋白质水解法生产 L 一亮氨酸的优点是生产设备简单，技术要求不高，并且 L 一亮氨酸在蛋白质中的含量较高。但是蛋白质水解法生产的缺点是费时、污染严重、收率低、产品质量得不到保证，大规模生产受到限制。化学合成法亮氨酸化学合成法有 A.Strecker, n 一卤代酸氨解、相转移催化等几种方法。虽然化学合成法原理简单，价格低廉，但操作复杂，反应条件苛刻，副产物多，产率不高，并且有的方法涉及到有毒物质。化学合成法得到亮氨酸是消旋的 DL 一亮氨酸，为了得到 L 一亮氨酸，必须进行光学异构体的拆分。因此化学合成
12、法很少用于 L 一亮氨酸的生产。酶催化法北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 7酶催化法生产 L 一亮氨酸通常是利用转氨酶转氨给 a 一酮基异己酸生成 L 一亮氨酸和组氨酸将相关的酶和 NADH 共价结合在膜上，让底物缓缓地经过膜而进行酶催化反应生成 L 一亮氨酸。如 1981 年，Wichmann er al.建立了一种用超滤膜制成的膜反应器，膜上共价结合了亮氨酸转氨酶、甲酸转氨酶、和 NADH，当底物。一酮基异己酸通过膜反应器后，可被催化生成 L 一亮氨酸，其中 NADH 通过甲酸同步氧化成 C02 实现再生。酶法生产氨基酸的
13、优点是转化能力强，可避免代谢调控中的反馈抑制和反馈阻遏，并且其生物反应器紧凑，产物组分相对单一，易进行后工序加工处理，可以提高产品质量，降低成本。但酶法生产中所用到的酶需通过微生物发酵生成并提取精制，工艺过程比较复杂，且成本较高，因此目前尚未得到广泛的应用。如果能够低成本获得高酶活的酶，则酶法生产 L 一亮氨酸是一条经济可行的工艺路线。微生物发酵法添加前体物发酵法1987 年德国学者 Groegere 采用添加前体物。一酮基异己酸生产 L 一亮氨酸，当培养基中添加前体物。一酮基异己酸的浓度为20g/L，谷氨酸棒杆菌 ATCC 13032 发酵 57h，可生成 16g/L L 一亮氨酸，质量转化
14、率 91-96%;而采用分批流加培养法，可流加 a 一酮基异己酸 32 g/L，发酵 23h，产 L 一亮氨酸 24 g/L，从。一酮基异北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 8己酸到 L 一亮氨酸的转化是经过转氨酶的催化生成的。生产工艺一 浓缩段原料：蒸汽将一次母液通入浓缩罐内，通入蒸汽，温度 120 度，气压-0.09Mpa，浓缩时间 6h，结晶。终点产物：结晶液（去一次中和段）二，一次中和段辅料：硫酸，纯水结晶液进入一次中和罐，通入硫酸，纯水，温度 80，中和时间4h，过滤终点产物：1，滤液（回收利用）2，滤渣（去氨解段）三
15、, 氨解段辅料：氨水，纯水，蒸汽滤渣进入氨解罐，通入氨水，纯水，蒸汽，温度 80，氨解时间3h，过滤终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（去脱色段）(胱氨酸)四，脱色段。辅料：蒸汽，纯水，活性炭滤渣进入脱色罐，通（投）入蒸汽，纯水，活性炭，温度 80，脱色时间 2h，过滤，北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政府申请土地、银行贷款、境内外融资等 9终点产物：1，滤渣（回收利用）2，滤液（去二次中和段）五，二次中和段辅料：氨水，蒸汽滤液进入二次中和罐，通入氨水，蒸汽，温度 80，中和时间4h，过滤，终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（即 L-亮氨酸粗品，去精制段
16、）六，精制段辅料：蒸馏水，蒸汽(组氨酸盐酸盐)用蒸馏水冲洗上段工序产品并离心甩干，送入烘干机，通入蒸汽烘干，包装，入库，烘干温度 100，烘干时间 3H。终点产物：L-亮氨酸成品作用及用途亮氨酸可作为营养增补剂；调味增香剂。 可配制氨基酸输液及综合氨基酸制剂，降血糖剂，植物生长促进剂。亮氨酸的作用包括与异亮氨酸和缬氨酸一起合作修复肌肉，控制血糖，并给身体组织提供能量。它还提高生长激素的产量，并帮助燃烧内脏脂肪，这些脂肪由于处于身体内部，仅通过节食和锻炼难以对它们产生有效作用。亮氨酸，异亮氨酸和缬氨酸都是支链氨基酸，它们有助于促进北京智博睿信息咨询有限公司 报告用途：发改委立项、政府申请资金、政
17、府申请土地、银行贷款、境内外融资等 10训练后的肌肉恢复。其中亮氨酸是最有效的一种支链氨基酸，可以有效防止肌肉损失，因为它能够更快的分解转化为葡萄糖。增加葡萄糖可以防止肌肉组织受损，因此它特别适合健美运动员。白氨酸还促进骨骼，皮肤，以及受损肌肉组织的愈合，医生通常建议手术后患者采取亮氨酸补充剂。由于它很容易转化为葡萄糖，因此亮氨酸有助于调节血糖水平。白氨酸缺乏的人会出现类似低血糖的症状，如头痛，头晕，疲劳，抑郁，精神错乱，和易怒等。亮氨酸最好的食物来源包括糙米，豆类，肉类，坚果，大豆粉，和全麦。由于它是一种必不可少的氨基酸，这意味着身体不能自己生产，只能通过饮食获得。从事高强度体力活动和低蛋白质饮食的人，应该考虑采取白氨酸补充。尽管有独立补充形式，但是最好还是与异亮氨酸和缬氨酸一起摄入。因此，选择混合型补充剂更为方便。但是和任何东西一样，过量摄入亮氨酸也会造成副作用，大量摄入已知与糙皮病， 维生素 A 缺乏症等问题有关系，并会引起皮炎，腹泻，精神失常等问题。饮食中含有过多亮氨酸还会增加体内氨的数量，并破坏肝，肾功能。因此，除非咨询过医生，否则肝或肾功能受损患者不应该采用大剂量的亮氨酸，这会导致病情恶化。另：提供国家发改委甲、乙、丙级资质北京智博睿信息咨询有限公司
