1、第三节 实验室常规诊断 v 在田间诊断中，诊断者凭借自己的经验和知识，利用放大镜观察病斑上的病征，对熟知的病害可以做出正确的诊断。v 但是在多数情况下由于症状表现的复杂性，病原的隐蔽性，诊断者不应当仅靠田间观察就作出诊断。而应采集有代表性的标本到实验室做进一步检查，借助实验技术做出正确诊断。一、真菌病害v 病斑上已产生子实体的真菌病害可直接采用显微镜镜检l 挑l 撕l 压l 切一、真菌病害v 对看不到真菌结构的标本保湿培养l 适温（ 2025oC）l 高湿（ 100% RH）l 2474小时二、细菌病害和菌原体病害v观察溢菌现象v但瘤肿病害的组织中菌体较少，观察不到溢菌现象。二、细菌病害和菌原
2、体病害v 有的细菌（如，韧皮部杆菌属）和植原体病害l 扫描电镜下可观察到植物韧皮部细胞内的病原l 用四环素类抗菌素灌注植物，病株出现一定时期的恢复，可间接证明是植原体病害。细菌病害病原的鉴定，必须经分离纯化后，做细菌学性状鉴定。柑橘黄龙病病原Liberobacter桑树黄化型矮缩病病原Phytoplasma葡萄皮尔氏病病原Xylella三、病毒病害v 内含体确诊有许多病毒在寄主细胞内形成内含体，可在光学显微镜下观察识别。三、病毒病害v 病毒粒体观察从病组织中挤出汁液，经负染后在透射电镜下观察病毒粒体形态与结构是十分快速而可靠的诊断。 三、病毒病害v 鉴别寄主诊断黄瓜花叶病毒属三种病毒在鉴别寄主上的反应鉴别寄主 黄瓜花叶病毒 花生矮化病毒 番茄不孕病毒花生 无症状 矮花叶 无症状菊花 不侵染 ？ 侵染黄瓜 花叶 花叶 无花叶四、线虫病害u 分离收集线虫l 植物器官外表、内部直接挑取l 简单的漏斗分离方法获得u 显微镜下辩认 植物寄生线虫l 具有吻针 而区别于非寄生性线虫第三节 柯赫氏法则（ Kochs Rule） 一、柯赫氏法则的意义u 针对不熟悉的病害，疑难病害和新病害v 观察到病斑上的微生物v 分离培养获得的微生物v 不足以证明这种生物就是病原物v 需要采用特殊的诊断方法 柯赫氏法则来证病
