第四章 植物细胞培养及次生产物代谢生产 一、悬浮培养 二、单细胞培养 三、植物细胞的规模化培养及有 用物质生产一、悬浮培养(cell suspension culture) 悬浮培养是细胞培养的基本方法,是将单个 游离细胞或小细胞团在液体培养基进行培养增殖的 技术。 1、愈伤组织诱导 要求:松散性好,增殖快,再生能力强。其外 观一般是鲜艳的乳白或淡黄色,呈细小颗粒状,松 散易碎。 适于悬浮培养适于再生植株如何获得符合要求的愈伤组织? 1、选择适宜的外植体:胚、胚轴、子叶 是最常用的外植体,特别是幼胚。 2、选择适宜的培养基:生长素浓度很重要 配合一定浓度的细胞分裂素;添加附加物 。 3、愈伤组织要进行继代选择:选择疏松性 好、细胞状态好的细胞不断继代培养。悬浮系建立过程 : 影响悬浮细胞生长的因素: 1、 起始愈伤组织的质量 2、 接种细胞密度 3、培养条件:方式、温度、 4、 继代周期 2、悬浮系的建立与继代培养 愈伤组织 1g愈伤/10ml培养基 150、250ml三角瓶(30、70ml培养基) 120rpm,25 黑暗培养,换液1次/3d以防粘稠 蔗糖梯度离心或过滤法(淘汰过大