5分子生物学研究法(上) 6 DNA、RNA及蛋白质操作技术 7 从20世纪中叶开始,分子生物 学研究得到高速发展,除了基础理论 的重大突破,主要原因之一是研究方 法,特别是基因操作和基因工程技术 的进步。基因操作主要包括DNA分子的 切割与连接、核酸分子杂交、凝胶 电泳、细胞转化、核酸序列分析以 及基因人工合成、定点突变和PCR 扩增等,是分子生物学研究的核心 与基本技术。基因工程是指在体外将核酸 分子插入病毒、质粒或其它载体 分子,构成遗传物质的新组合, 使之进入原先没有这类分子的寄 主细胞内并进行持续稳定的繁殖 和表达。基因工程技术是核酸操作技术的一 部分,只不过它强调了外源核酸分子在 另一种不同的寄主细胞中的繁衍与性状 表达。 事实上,这种跨越物种屏障、把来 自其它生物的基因置于新的寄主生物细 胞之中的能力,是基因工程技术区别于 其它技术的根本特征。5.1重组DNA技术回顾 三大成就: 第一,在20世纪40年代确定了遗传信息的携 带者、即基因的分子载体是DNA而不是蛋白 质解决了遗传的物质基础问题; 第二,50年代提出了DNA分子的双螺旋结构 模型和半保留复制机制解决了基因的自