第六章 分子生物学研究法(下) 基因功能研究技术 本章主要介绍研究基因功能的各种分子生物学技 术和方法,比如通过这些方法研究: (1)单个或多个基因在生物体的某些特定发育阶 段或在不同环境下的表达模式; (2)某基因缺失后生物体表型变化分析该基因 功能; (3)蛋白质相互作用认识信号转导通路等。 6.1.1 基因表达系列分析技术 基因表达系列分析技术(SAGE)是一种 以DNA序列测定为基础定量分析全基因组表达 模式的技术。 SAGE的操作过程如下图或书中图6-1所示。 6.1 基因表达研究技术 RNA选择性剪接是指用不同的剪接方式从一 个mRNA前体产生不同的mRNA剪接体的过程。 选择性剪接一般分为:平衡剪接,5 选择性剪接 ,3选项择性剪接,外显子遗漏和相互排斥性剪 接。如6-2。 发现新的可变剪接体(splice variant),确 定每个异构体(isoform)的独特功能和生物学意 义并阐明其调节机制,是功能基因组时代的一个 重要特征。 6.1.2 RNA 的选择性剪接技术BTLA剪接体基因的结构分析 RT-PCR法克隆人BTLA编码区基因电泳结果 BTLAs(BTLA s