生物化学实验基本技术 第一节 生物大分子的基本制备技术 一、盐析(Salting out)技术 定义:蛋白质在高浓度盐的溶液中,随着盐浓度的逐渐增加, 由于蛋白质水化膜被破坏、溶解度下降而从溶液中沉 淀出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同 浓度的盐溶液来沉淀分离各种蛋白质。 影响因素: 1.盐的种类 2.盐的浓度 3.pH值 4.温度 5.蛋白质浓度 二、透析和超滤 (Dialysis and Ultrafiltration) 1.透析 是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜 而进行纯化的一种方法。 2.超滤 是利用具有一定大小孔径的微孔滤膜,对生物大分子溶液 进行过滤(常压、加压或减压),使大分子保留在超滤膜 上面的溶液中,小分子物质及水过滤出去,从而达到脱盐、 更换缓冲液或浓缩的目的。 第二节 分光光度法 一、基本原理 当一束白光通过一杯有颜色的溶液时,具有一定波长的 光线选择性的被溶液所吸收。不同物质由于其分子结构 不同,对不同波长光线的吸收能力不同,因此每种物质 都具有其特异的吸收光谱。吸收光谱的测定可以用来鉴 定各种不同的物质。 分光光度法常被用来测定溶液中存在的光吸