软琼脂克隆形成实验步骤(完整版)(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上* Soft Agar Assay for Colony Formation*软琼脂克隆形成实验步骤 *注意:软琼脂克隆形成试验方法简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。软琼脂培养法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个,正常细胞在悬浮状态下不能增殖,不适用于软琼脂克隆形成试验。1、配制100ml的1.2% Argrose和0.7%Argrose,Argrose用DNA电泳用BIOWEST REGULAR Argrose G10(4),溶剂用双蒸水(DDW),高压灭菌后,维持在42中不会凝固;配制500ml的21640和0.005%的结晶紫。2、实验前,将水浴锅放入超净台内,紫外照射,设定温度42。提前融化血清和双抗。3、如已制好上下胶,则在微波炉中溶解1.2%Argrose下胶和0.7% Argrose上胶,降温后放入42水浴锅中保持。4、根据实验需要的量配

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