第七章 免疫电镜一 电镜免疫组织化学技术概述 二 几种常用的透射电镜方法要点一 电镜免疫组织化学技术概述 特异性抗体用电子致密物质，如铁蛋白、胶体金等标记后， 使之与组织超薄切片中的抗原结合，在电镜下观察到标记物 所在位置，即为抗原抗体反应的部位。 v （一）组织固定与取材 v （二）免疫染色 v （三）包埋 v （四）对照试验（一）组织固定与取材 v 原则： 既要保存良好的细胞超微结构，又要注意保持组织的抗原性。 v 固定： 固定剂的要求： 不损害细胞内抗原的活性； 固定速度快、效果好； 分子量小，易于渗透； 固定后,不引起交联，造成空间的阻碍，影响标记抗体进 入抗原位。 影响固定的因素有： 固定剂的种类； 固定剂的浓度，浓度过大，对抗原的活性有影响，浓度 过小，固定效果差； 固定剂的pH； 固定剂的温度,一般采用24冷固定；这样能降低 细胞自溶作用和水分抽提； 固定时间与温度有关，温度高，固定快，也与缓冲系的 离子强度有关，离子强度大，渗透压大，穿透力强，固定 要快。不同的固定剂，或同一固定剂的不同浓度所需的固 定时间也不一致； 与被固定的细胞类型有关。 选用固定剂不宜过强。常采用
