第三章:基因药物体外表达的 受体细胞第一节、宿主细胞选择原则 1、容易获得较高浓度的细胞; 2、安全,不致病; 3、遗传背景清楚,容易进行DNA重组操作及遗传改造; 4、产物的产量高(表达水平和稳定性) 、生物活性高 5、产物容易提取纯化。 6、容易进行代谢调控; 7、易培养(生长速度、营养需求、氧耗量等),培养成本 低第二节、宿主细胞分类及特点 n 分类:原核细胞(大肠杆菌、枯草芽胞 杆菌、链霉菌等) n 真核细胞(酵母细胞、哺乳动物 细胞、昆虫细胞)一、原核表达系统的特点 n (一)优点: 1、结构简单,基因组成及功能相对清楚, 易于遗传操作及转化 2、生理代谢途径及表达调控机制相对清楚 ,便于表达调控 3、生长迅速,要求条件低(大肠杆菌倍增 时间为17分钟),易于大规模培养。(二)缺点 1、不能识别剪切内含子,不能表达基因组DNA, 只能表达cDNA; 2、缺乏真核生物的蛋白质加工修饰系统,不能进 行蛋白酶解、糖基化、磷酸化、乙酰化、硫酸化 、酰胺化等修饰作用; 蛋白酶解作用:从蛋白前体中切去一段氨基酸序列,从 而获得功能性分子 糖基化意义:赋予蛋白独特的结合性并增强稳定性 3、