等 电 聚 焦 电 泳 Isoelectric Focusing Electrophoresis，IEFE一、IEFE 定义 IEFE一种利用具有pH梯度 的支持介质分离等点电不同的 蛋白质的电泳技术。 各种蛋白质各自都有一个等电点, 在一特殊的pH环境中,蛋白质分子呈电 中性,在电场中不会迁移。 等电聚焦就是在电泳介质中放入载 体两性电解质，当通以直流电时，两性 电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增 加的pH梯度，在此体系中，不同的蛋白 质即移动到或聚焦于其相当的等电点位 置上，也就是说被聚焦于一个狭的区带 中，电泳技术中的等电点聚焦也称为聚 焦电泳。二、IEFE的特点 （一）优点 n 1.分辨率高（精密度可达0.01pH单位 ）， 灵敏度高（最低检出量达0.1ng）。 n 2.电泳区带相当狭窄。 n 3.重复性好。（二）缺点 n 1.要求用无盐溶液，而在无盐溶液中蛋 白质可能发生沉淀。 n 2.样品中的成分必须停留在其pI，不适 用 在pI不溶或发生变性的蛋白质。 分辨率较不连续PAGE更高，特 别适合于分离分子量相同而电荷不 同的生物大分子。三、IEFE的基本原理蛋白质分子在不同p
