高效液相色谱法 化学化工学院1.HPLC仪器结构及原理 注射器 进样器 高压泵 混合室 溶剂 预柱 接头 色谱柱 检测器 数据系统n根据各组分在固 定相及流动相中的 吸附能力、分配系 数、离子交换作用 或分子尺寸大小的 差异，因此在同一 推动力作用下，不 同组分在固定相中 的滞留时间有长有 短，从而实现分离 的目的 1.HPLC仪器结构及原理3.操作条件的选择流动相的选择 流动相要求： (1)溶剂应当是高纯度，溶剂与固定相不互 溶，并能保持色谱柱的稳定性； (2)溶剂的性能与使用的检测器应当匹配； 选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要 长，甲醇：205nm; 乙腈：190nm (3)溶剂对样品应有足够的溶解能力； (4)溶剂应具有低的粘度和适当低的沸点； (5)尽量避免使用具有显著毒性的溶剂。常用流动相溶剂： 反向色谱常用流动相及冲洗强度 H 2 O甲醇乙腈丙醇异丙醇四氢呋喃 最常用组成：甲醇/ H 2 O 、 乙腈/ H 2 O 洗脱顺序：极性物质先洗脱下来 正想色谱常用流动相及冲洗强度 正乙烷乙醚乙酸乙酯异丙醇洗脱方式等度洗脱、梯度洗脱 等度洗脱： 整个洗脱过程中，流动相的组成比保
