植物基因工程 根癌农杆菌介导法农杆菌 l 农杆菌是普遍存在于 土壤中的一种革兰氏 阴性细菌,它能在自 然条件下趋化性地感 染大多数双子叶植物 的受伤部位,并诱导 产生冠瘿瘤或发状根 。 原理 l 根癌农杆菌的细胞内有一个大的致瘤质粒,简称 Ti质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物 伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中 。 l 因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系, 改 造的Ti质粒就是一个优良的植物转基因载体。 Ti Ti 质粒结构 质粒结构 特点 特点 l 转移到植物基因组中的 DNA序列,与肿瘤形相关 。 l 激活T-DNA的转移,使植 物致瘤,是毒性区。 l 调控Ti质粒在根癌农杆 菌之间的转移,是接合 转移编码区。 l 调控Ti质粒的自我复制 ,为复制起始区。 Ti-质粒的基因结构 T-DNA区 (transferred DNA region) Vir区 (virulence region) Con区 (region encoding conjugation) Ori区 (origin of replication)Ti质粒的改造 策略 由于野生Ti质