荧光定量PCR在临床 医学中的应用内容提要 一、基因诊断技术简介 二、乙型肝炎的病原检测 三、丙型肝炎的病原检测 四、性病相关病原体的检测基因诊断技术简介4 基因诊断 3 免疫学诊断 临床诊断 细胞膜 细胞核 DNA 转录 mRNA 翻译 蛋白质 1 形态学诊断 2 生化诊断 概念PCR与基因诊断技术 l 基因诊断即通过核酸的分子生物学检测直接检测基 因的存在状态或缺陷对疾病作出诊断的方法。 l Polymerase chain reaction(PCR),聚合酶链式反 应,是一种DNA的快速扩增技术。PCR技术通过两 个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热酶的作用 ,可在3个小时内把特定的DNA片段扩增1000万倍 。 l 九十年代中期PCR临床应用在国内全面开展,1998 年,荧光定量PCR技术开始在中国应用于临床检测 。荧光定量PCR技术 l 实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加 入荧光标记,利用荧光信号积累实时检测整个 PCR过程,通过标准曲线对PCR终产物的分析 ,最终实现对未知的起始模版进行定量分析的 一种技术,是迄今对已知基因序列的核酸测定 中最灵敏的方法。 荧光染