血红蛋白 本课题学习目标 本课题学习目标 体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法,并了 解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。 1 1 、主要概念: 、主要概念:凝胶色谱法 电泳法 缓冲溶液 它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。 2 2 、主要原理: 、主要原理:凝胶色谱法分离蛋白质的原理 电泳法分离样品的原理 缓冲溶液的组成和作用机理 3 3 、课题重点: 、课题重点:凝胶色谱法的原理和方法 4 4 、课题难点: 、课题难点: 样品的处理 色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。1、凝胶色谱法 凝胶色谱法也称为分配色谱法,它是根 据分子量的大小分离蛋白质的方法之一,又 称分子筛层析 。 凝胶实际上是一些微小的多孔球体,例 如:浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙 烯酰胺、葡聚糖凝胶等 一、基本概念及原理原理: 当不同的蛋白质通过凝胶时 相对分子质量较小 相对分子质量较大 凝胶内部的通道 容易进入 无法进入凝胶 内部的通道 只能在凝胶外部移动 路程较长 移动速度较慢 路程较短 移动速度较快 相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。4. 4. 凝胶色谱法 凝胶色谱法分离蛋白质 的原