1 蛋白质晶体结构解析2 1. 蛋白质结构解析技术 X射线晶体衍射 核磁共振(NMR) 电镜技术 核磁共振技术不需要获得生物大分子的晶体,适用 于均一稳定的、分子量在30 kD 以下的生物大分 子溶液,并且能够提供生物大分子的动力学信息 近年来电镜尤其是单颗粒冷冻电镜三维重构 技术的发展使得人们能够更方便地研究分子 量在 150 kD 以上的生物大分子,其分辨率 能够到达 3 4 。 X射线晶体学可以通过测定蛋白质分子在晶体中 电子密度的空间分布,在一定分辨率下解析蛋 白质中所有原子的三维坐标。3 专门存储蛋白质和核酸分子结构的蛋白质数据库中,接近90% 的蛋白质结构是用X射线晶体学的方法测定的。 大约9%的已知蛋白结构是通过核磁共振技术来测定的。该技 术还可用于测定蛋白质的二级结构。 冷冻电子显微技术是近年来兴起的一种获得低分辨率(低于5 埃)蛋白质结构的方法,该方法最大的优点是适用于大型蛋白质 复合物(如病毒外壳、核糖体和类淀粉蛋白纤维)的结构测定。4 2. 数据收集 3. 相位的测定 4. 相位的优化 5. 电子密度图的解释 6. 修正 2. X射线晶体衍射法 测定蛋白质结构的基