质立DNA的酶切鉴定及琼脂糖凝胶电泳ppt课件.ppt

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实验三 质粒DNA的酶切鉴定 及琼脂糖凝胶电泳1. 实验目的和要求 学习和掌握限制性内切酶的特性、酶 解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,并 理解限制性内切酶是DNA重组技术的 关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴 定DNA片段的有效方法。 2. 相关基础知识 限制性核酸内切酶:是一类能识别双 链DNA分子特异性核酸序列的DNA水 解酶。是体外剪切基因片段的重要工 具,所以常常与核酸聚合酶、连接酶 以及末端修饰酶等一起称为工具酶。 限制性核酸内切酶不仅是DNA重组中 重要的工具,而且还可以用于基因组 酶切图谱的鉴定。1) 寄主控制的限制与修饰现象 2) 核酸限制性内切酶的类型 3) 核酸限制性内切酶的基本特性 4) 同裂酶和同尾酶 5) 核酸限制性内切酶的命名法 6) 影响核酸限制性内切酶活性的因素1) 寄主控制的限制与修饰现象 限制与修饰系统是细胞的一种防卫手段。 各 种细菌都能合成一种或几种能够切割DNA双 链的核酸内切酶,它们以此来限制外源DNA 存在于自身细胞内,但合成这种酶的细胞自 身的DNA不受影响,因为这种细胞还合成了 一种修饰酶,对自身的DNA进行了修饰,限 制性酶对修饰过的DN

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