实验 单向、双向免疫琼脂 扩散沉淀反应 l 可溶性抗原(如细菌外毒素、血清蛋白等)与相应抗体特异性结合后,在一定条件 (适量电解质、适宜的pH值及温度)下,经过一定时间,在比例适宜处形成肉眼 可见的沉淀现象。沉淀反应 沉 淀 反 应 环状沉淀反应 絮状沉淀反应 琼脂扩散试验 双向扩散 单向扩散 电 泳 技 术 火箭免疫电泳 对流免疫电泳单向免疫琼脂扩散实验原理 l 将适量的抗体均匀混入琼脂内制成琼脂板,打孔,在孔中加入一定量的待测抗原 ,抗原向四周呈辐射状扩散,与抗体相遇,在比例合适时形成白色沉淀环。实验原理 l 此方法用已知的抗体测未知的抗原。由于抗体已与凝胶混合,不会再扩散,仅抗 原从小孔向四周扩散,因此称为单向琼脂扩散试验。 l 沉淀环直径的大小与抗原含量成正比,用标准抗原制成标准曲线,从标准曲线上 ,可以查出待检样品中抗原的含量。实验原理 1.测定沉淀环直径 2.在标准曲线上查找相应抗原浓度 绘制标准曲线 标准品抗原浓度测定 不同病人抗原浓度测定实验方法 (一)标准曲线的制备 l 制作琼脂板所需要的1%盐水琼脂(4mL)。 l 首先分装其1/2量的2%盐水琼脂,溶化后置56水浴