精选优质文档-倾情为你奉上1、真核细胞DNA的制备一般真核细胞基因组DNA 有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。这一方法获得的DNA不仅经酶切后可用于Southern分析，还可用于PCR的模板、文库构建等实验。根据材料来源不同，采取不同的材料处理方法，而后的DNA提取方法大体类似，但都应考虑以下两个原则：1、防止和抑制DNase对DNA的降解。2、尽量减少对溶液中DNA的机械剪切破坏。试剂准备：1、TE:10mMTris-HCl(pH7.8);1mMEDTA(pH8.0)。2、TBS:25mMTris-HCl(pH7.4);200mMNaCl;5mMKCl。3、裂解缓冲液：250mMSDS;使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。4、20%SDS5、2mg/ml 蛋白酶K6、Tris饱和酚（pH8.0）、酚/氯仿（酚氯仿=11）、氯仿7、无水乙醇、75%乙醇试验步骤：材料处理：1、新鲜或冰冻组织处理：1
